維甲酸對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、子宮內(nèi)膜癌是女性生殖道常見三大惡性腫瘤之一，子宮內(nèi)膜癌占女性總癌瘤7％，占女性生殖器惡性腫瘤的20％～30％，居婦科惡性腫瘤第2位，近20年來在世界范圍內(nèi)子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率有上升趨勢。影響子宮內(nèi)膜癌預(yù)后的因素包括：手術(shù)-病理分期，組織學(xué)類型及分級，肌層浸潤深度，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腹腔液細(xì)胞學(xué)檢查，治療方案等。經(jīng)手術(shù)為主，放療、化療、內(nèi)分泌治療為輔的綜合治療，子宮內(nèi)膜癌總的五年生存率為60％-70％，晚期患者的五年生存率不到30％。越來越多的學(xué)者

2、提出綜合治療，個體化治療的理念。尋求新的藥物也得到人們的重視。 維甲酸類藥物近年來在臨床上廣泛用于治療白血病，也已經(jīng)用于消化系統(tǒng)腫瘤的治療，與5-FU聯(lián)用，用于肝癌的治療已初見成效。維甲酸對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的作用卻鮮有報道。 肝細(xì)胞生長因子(HGF)是一個多功能生長因子。HGF的單一受體c-met是一跨膜蛋白，由原癌基因C-met編碼。在甲狀腺癌、胃癌、腸癌、卵巢癌、胰腺癌、腎癌、乳腺癌、前列腺癌子宮內(nèi)膜癌中C-Met被過

3、表達(dá)。HGF/C-Met系統(tǒng)被認(rèn)為與腫瘤的增生、浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)。在惡性腫瘤中C-Met表達(dá)的水平與外科分級，組織學(xué)分級及短生存率有關(guān)。阻斷HGF/C-met系統(tǒng)的表達(dá)或信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路將為腫瘤治療提供新的思路。 目的： 通過觀察HGF、ATRA(反式維甲酸)對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞HEC-2B增殖的影響及檢測子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞HEC-2B中HGF受體C-Met表達(dá)，了解維甲酸對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的作用及其可能機(jī)制。 材料與方法：

4、 1．體外培養(yǎng)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞HEC-2B。 2．用不同劑量的HGF及ATRA作用于HEC-2B。 3．MTT的方法分析細(xì)胞的增殖力。 4．用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的增殖周期。 5．RT-PCR技術(shù)檢測ATRA作用前后細(xì)胞中HGF受體C-Met的表達(dá)。 6．統(tǒng)計學(xué)分析：采用t檢驗(yàn)的方法，P<0.05時具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1．HGF 促進(jìn)細(xì)胞的增殖并表現(xiàn)為劑量依賴關(guān)系，各處理組

5、與對照組相比，p<0.05．當(dāng)HGF濃度達(dá)到60ng/ml時，增殖水平較對照上調(diào)約1.9倍。 2．C-Met在HEC-2B細(xì)胞中表達(dá)。 3．單獨(dú)使用ATRA(10<'-6>M)處理HEC-2B，并不能夠影響細(xì)胞的增殖能力。但是，如果與具有明顯促細(xì)胞增殖作用的60ng/ml HGF共處理，10<'-7>M的ATRA即能夠明顯抑制前者的促增殖作用(p<0.01)，而且表現(xiàn)出一定的量效關(guān)系。 4．ATRA能夠有效抑制H

6、EC-2B細(xì)胞中C-Met的轉(zhuǎn)錄水平。10<'-7>M的ATRA即有明顯作用(p<0.01)，10<'-6>M的作用最為顯著(p<0.01)。有呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。經(jīng)ATRA處理0.5h后，C-Met的轉(zhuǎn)錄水平即開始下降，隨著處理時間的延長，ATRA的抑制作用趨于明顯(p<0.01)，有明顯的時間依賴性。 討論： 1．C-Met在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中的表達(dá)。 2．HGF促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖。 3．HGF/

7、C-Met在子宮內(nèi)膜與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用。 4．ATRA與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系。 結(jié)論： 1．子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞HEC-2B 中存在C-Met受體，C-Met在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中能穩(wěn)定的表達(dá)。 2．HGF/C-Met能夠在體內(nèi)外促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖。 3．通過抑制c-met的表達(dá)調(diào)控細(xì)胞的增殖可能是維甲酸對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞作用的通路之一。 4．維甲酸有希望成為治療子宮內(nèi)膜癌的藥物之一。