pf40基因在玉米中的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、高等植物的分枝研究一直是植物界研究植物發(fā)育的熱點。伴隨著與分枝相關(guān)的突變體的獲得和分子生物學技術(shù)的應用，高等植物分枝的研究進展很快。對禾本科作物來說，它們的分枝，即所謂的分蘗，具有一定的特殊性。 pf40基因是來源于谷子未成熟種子cDNA文庫，它或其同源基因普遍存在于禾本科植物中。初步研究顯示pf40基因有促進分枝(分蘗)的功能。因此本項研究的主要目的是通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將來源于谷子的pf40基因轉(zhuǎn)入到玉米中，通過觀察玉米的分枝(

2、分蘗)表型的改變，初步探討玉米中的pf40基因或其同源基因的功能，為今后的進一步研究奠定基礎。 我們將pf40基因正義表達載體和RNAi載體通過基因槍法導入常規(guī)玉米Z3、Z31、Q31的雜交組合愈傷組織，通過一系列的分子檢測，不同載體獲得了不同的轉(zhuǎn)化效率，其中正義表達載體的轉(zhuǎn)化效率是7.81％，RNAi載體的轉(zhuǎn)化效率為14.6％。 通過對T1、T2代再生植株的分子檢測，共得到T2代Southern雜交陽性的轉(zhuǎn)基因玉米植株

3、10株，其中轉(zhuǎn)正義載體的植株為4株，分屬于4個不同的株系(T1代)；轉(zhuǎn)RNAi載體的植株為6株，分屬于4個不同的株系(T1代)。說明外源pf40基因已經(jīng)整合到玉米基因組中，并能穩(wěn)定地遺傳到下一代，經(jīng)RNA點雜交分析，外源pf40基因己在玉米中得到表達。 通過對轉(zhuǎn)pf40基因玉米莖基部的分蘗表型和雄穗的分枝表型的觀察發(fā)現(xiàn)，無論是轉(zhuǎn)正義表達載體的轉(zhuǎn)基因植株還是RNAi載體的轉(zhuǎn)基因植株與未轉(zhuǎn)基因植株均無明顯差異。玉米中的pf40基因或