刺激隱核蟲（Cryptocaryon irritans）與多子小瓜蟲（Ichthyophthirius multifiliis）免疫學(xué)特性研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文刺激隱核蟲（Cryptocaryonirritans）與多子小瓜蟲（Ichthyophthiriusmultifiliis）免疫學(xué)特性研究姓名：羅曉春申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：水生生物學(xué)指導(dǎo)教師：謝明權(quán)20050520構(gòu)則通過透射電鏡進(jìn)行觀察。結(jié)果表明粘膜組織中存在多種免疫相關(guān)細(xì)胞，包括杯狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞及中性粒細(xì)胞等。杯狀細(xì)胞分布于皮膚表皮、鰓上皮及腸道上皮層中，他們分泌的粘液形成了

2、機(jī)體對(duì)病害的第一道屏障。淋巴細(xì)胞在后腸腸道固有層及鰓血竇腔中相當(dāng)豐富，在前腸固有層及皮膚表皮及真皮層問也有分布。淋巴細(xì)胞在粘膜組織中的存在提示粘液中的抗體可能是局部淋巴細(xì)胞分泌的。通過免疫組化的方法也在鰓和后腸中觀察到了抗體分泌細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和粒細(xì)胞的分布情況與淋巴細(xì)胞類似，這些細(xì)胞在魚類粘膜免疫中的非特性免疫，及特異性免疫應(yīng)答中的抗原呈遞中超到了重要的作用。在魚眼角膜中未觀察到免疫細(xì)胞的存在。本章還就魚類粘膜免疫系統(tǒng)的特異性及非特異性

3、免疫應(yīng)答，以及粘膜免疫是否獨(dú)立于系統(tǒng)免疫等問題進(jìn)行了討論。我們還建立了魚類皮膚體外培養(yǎng)的方法。通過對(duì)皮膚生長(zhǎng)、黑色素細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞活率、皮膚組織學(xué)觀察及抗體分泌情況等指標(biāo)的測(cè)試，證明該皮膚培養(yǎng)方法是成功的，該方法將有助于對(duì)魚類粘膜免疫應(yīng)答的研究。在前面研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步對(duì)刺激隱核蟲引起的保護(hù)性免疫應(yīng)答進(jìn)行了研究。結(jié)果表明無論是腹腔注射還是體表感染，都可以引起石斑魚的保護(hù)性免疫應(yīng)答。免疫魚血清和皮膚培養(yǎng)上清液中的抗體可以引起刺激隱核蟲幼

4、蟲的阻動(dòng)。通過免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，引起免疫應(yīng)答的蟲體抗原主要分布在細(xì)胞膜抗原，特別是其纖毛上。血清及皮膚上清液中的抗體效價(jià)通過ELlSA和阻動(dòng)試驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明在初次免疫12周后的魚中可檢測(cè)到特異性抗體，抗體效價(jià)隨后逐漸升高，在46周時(shí)達(dá)到高峰，并在8周攻毒時(shí)，仍保持相當(dāng)?shù)目贵w水平。攻毒實(shí)驗(yàn)表明，免疫魚得到了很好的保護(hù)，而對(duì)照魚則全部死亡。這些結(jié)果表明體液免疫應(yīng)答，特別是粘膜中的免疫應(yīng)答對(duì)魚類抵御該病的侵害中，起了重要的作用疫苗將