石斑魚APC相關(guān)基因在刺激隱核蟲感染后的表達(dá)分析.pdf

1、抗原遞呈細(xì)胞（Antigen-presenting cell，APC）是一類可在其細(xì)胞表面表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體（Major histocompatibility complexes,MHCs）并將加工后的抗原信息通過T細(xì)胞受體（T cell receptors,TCR）遞呈給T細(xì)胞的細(xì)胞。專職抗原遞呈細(xì)胞包括：樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和B細(xì)胞。這些細(xì)胞通過多種方式獲得抗原后，可對(duì)抗原進(jìn)行加工并與MHC II類分子結(jié)合后激活T細(xì)胞，啟動(dòng)適

2、應(yīng)性免疫反應(yīng)。刺激隱核蟲作為一種寄生性海水纖毛蟲，對(duì)熱帶和亞熱帶海水魚類危害極其嚴(yán)重。大量實(shí)驗(yàn)證明了刺激隱核蟲的感染可引起海水魚類的適應(yīng)性免疫應(yīng)答。為揭示抗原遞呈細(xì)胞在刺激隱核蟲感染過程中可能發(fā)揮的作用，本文基于刺激隱核蟲感染斜帶石斑魚后的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫，克隆獲得了7個(gè)APC相關(guān)基因（EcIL-34、EcMCSF2、EcMCSFR2、EcCCR6A、EcCCR6B、EcCD83和 EcCD208）的ORF序列。其中巨噬細(xì)胞相關(guān)基因 EcI

3、L-34、EcMCSF2和EcMCSFR2等分子的ORF分別為657 bp、804 bp和3141 bp，分別編碼218、267和1046個(gè)氨基酸，理論原子質(zhì)量為25.50 kDa、31.02 kDa和117.72 kDa。樹突狀細(xì)胞相關(guān)基因EcCCR6A、EcCCR6B、EcCD83和EcCD208等分子的ORF分別為1134 bp、1089 bp、675 bp和771 bp分別編碼377、362、224和256個(gè)氨基酸，理論原子質(zhì)量

4、為43.03 kDa、40.81 kDa、24.78 kDa和28.12kDa。序列的結(jié)構(gòu)，同源性和進(jìn)化樹分析結(jié)果認(rèn)為這7個(gè)基因均與在其他物種上報(bào)道的同源基因相似。組織分布結(jié)果顯示APC相關(guān)基因雖然存在不同的表達(dá)模式，但主要在免疫組織中表達(dá)。EcIL-34主要在腦組織表達(dá)，緊接著在鰓、脾臟、皮膚和肌肉等部位均有表達(dá)，而在肝臟和胸腺則表達(dá)較少；EcMCSF2則在頭腎和中腎表達(dá)量最高，在鰓和胸腺表達(dá)量較少；EcMCSFR2在脾臟，頭腎和鰓中

5、高表達(dá)，而在肌肉、胸腺和心臟中低表達(dá)。兩個(gè)EcCCR6均在鰓上表達(dá)量最高，而在心臟、肝臟和肌肉中均沒有檢測到表達(dá)量；在腦中主要表達(dá) EcCCR6A而在頭腎和中腎中則主要表達(dá) EcCCR6B，兩者在其余組織中表達(dá)量相近。EcCD83在胸腺上表達(dá)量最高，在非淋巴組織表達(dá)較低；EcCD208在中腎表達(dá)量最高，緊接是在鰓、皮膚、腦和心臟表達(dá)，而在其余組織表達(dá)量很低。對(duì) APC相關(guān)基因在刺激隱核蟲感染后的表達(dá)譜分析發(fā)現(xiàn)，所有6個(gè)表面分子（EcMC

6、SFR1、EcMCSFR2、EcCCR6A、EcCCR6B、EcCD83和EcCD208）均在感染后的皮膚上顯著上調(diào)，一方面可能是這6個(gè)表面分子在其陽性細(xì)胞上的表達(dá)量上調(diào)，另一方面可能是更多該分子的陽性細(xì)胞聚積到感染部位的皮膚上。而在感染后的其余部位，雖然各個(gè)分子間的表達(dá)存在差異，但總體上，在鰓和頭腎上也是上調(diào)表達(dá)較多，而在脾臟上則是普遍下調(diào)表達(dá)，推測可能是抗原遞呈細(xì)胞從系統(tǒng)免疫器官遷移到感染部位進(jìn)行免疫反應(yīng)的結(jié)果。綜上所述，初步推測石