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文檔簡介
1、近年來,隨著大黃魚養(yǎng)殖規(guī)模日益擴(kuò)張,網(wǎng)箱養(yǎng)殖大黃魚的病害頻發(fā),其中大黃魚“白點病”成為危害最為嚴(yán)重的流行性疾病之一。“白點病”病原為刺激隱核蟲(Cryptocaryon irritans),病魚大量感染該寄生蟲后,會出現(xiàn)體表、鰭條及鰓瓣布滿肉眼可見的大小白色點狀蟲體和包囊,活動異常、上皮增生、呼吸困難、機(jī)械損傷等病癥。本文利用分子生物學(xué)技術(shù),構(gòu)建并完善了 LAMP檢測方法;采用該方法對養(yǎng)殖大黃魚海區(qū)、魚體組織等感染刺激隱核蟲跟蹤檢測,闡
2、述了2012~2013年期間,刺激隱核蟲感染養(yǎng)殖大黃魚的規(guī)律;研究了溫度、鹽度等海區(qū)水體理化因子對刺激隱核蟲感染的影響;分析了刺激隱核蟲對不同魚體組織的感染差異;為大黃魚刺激隱核蟲病的防控技術(shù)研究以及實行刺激隱核蟲病原的檢測、監(jiān)測等提供了理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。
本文依賴自動循環(huán)鏈置換反應(yīng),通過識別靶序列上4個特異區(qū)域的引物和具有鏈置換的DNA聚合酶,在 Mg2+濃度為2 mmol-1、反應(yīng)溫度61℃~66℃,內(nèi)外引物濃度2:1~
3、6:1、反應(yīng)時間60min的優(yōu)化條件下,擴(kuò)增出呈特異性 LAMP梯形條帶產(chǎn)物,構(gòu)建完善了 LAMP檢測方法。該檢測方法操作簡便、高度靈敏、準(zhǔn)確性高、實用性強(qiáng),既能檢出未發(fā)病但已感染的病魚,又能檢測發(fā)病魚,為快速檢測刺激隱核蟲提供新方法。
研究養(yǎng)殖海區(qū)水溫對刺激隱核蟲感染大黃魚影響:春夏(5月份下旬~7月份上旬)和夏秋(8月份下旬~10月份上旬)是刺激隱核蟲感染大黃魚的高峰期,水溫成為影響刺激隱核蟲病發(fā)生的最主要水質(zhì)因子之一,水
4、溫的變化直接影響大黃魚感染率,通過水溫的監(jiān)測可對刺激隱核蟲病預(yù)警預(yù)防。
研究養(yǎng)殖海區(qū)鹽度對刺激隱核蟲感染大黃魚影響:養(yǎng)殖海區(qū)2012~2013年鹽度波動范圍為:20‰~30‰之間,此區(qū)間在刺激隱核蟲耐受限度范圍內(nèi),較適宜刺激隱核蟲的生長、發(fā)育、繁殖和生活。
研究刺激隱核蟲對魚體不同組織的感染差異:當(dāng)大黃魚受到刺激隱核蟲感染時,其鰓組織最先受到感染,且會迅速大量繁殖,短時間內(nèi),鰓組織就將嚴(yán)重受到破壞,并呼吸困難,最終死
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