三種致病弧菌感染養(yǎng)殖大黃魚的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、目前已明確引起大黃魚潰瘍病的病原菌主要有溶藻弧菌、哈維弧菌和副溶血弧菌。這些病原菌只有在魚體中繁殖積累到一定程度時(shí)，才開始影響魚體正常生活，對(duì)組織造成損傷從而引起疾病。因此，如何依據(jù)疾病的流行病學(xué)進(jìn)行早期病原生物檢測(cè)，分析病原生物的感染狀況及其削長(zhǎng)趨勢(shì)，實(shí)現(xiàn)病害的預(yù)測(cè)預(yù)警就顯得至關(guān)重要。本課題以引起養(yǎng)殖大黃魚潰瘍病的三種致病弧菌為研究對(duì)象，開展分子流行病學(xué)調(diào)查與分析，為養(yǎng)殖大黃魚疾病的預(yù)防與控制起到積極的預(yù)警作用。
　　本研究以浙

2、江省象山縣黃避岙大黃魚養(yǎng)殖海區(qū)為實(shí)驗(yàn)點(diǎn)，選定投喂魚蝦等鮮活餌料的大黃魚網(wǎng)箱3組，分別為一齡魚、二齡魚、三齡魚；投喂配合飼料的二齡大黃魚網(wǎng)箱1組。于2012-2013年在定點(diǎn)網(wǎng)箱組各隨機(jī)采集大黃魚10尾，每尾實(shí)驗(yàn)魚分別取肝、腎、脾、肌肉等組織提取總 DNA，利用三種弧菌多重 PCR技術(shù)進(jìn)行感染情況的檢測(cè)與分析。每次采集大黃魚同時(shí)，還跟蹤監(jiān)測(cè)了養(yǎng)殖網(wǎng)箱內(nèi)及海區(qū)航道中央水體的理化因子及生物因子。包括水溫、鹽度、透明度、溶解氧、p H、磷酸鹽、

3、硝氮、總氮、總磷、化學(xué)耗氧量、TOC、葉綠素a，弧菌總數(shù)、糞大腸菌群數(shù)等指標(biāo)。
　　結(jié)果顯示三種致病弧菌對(duì)大黃魚的感染存在一定的差異性。溶藻弧菌、哈維弧菌對(duì)大黃魚的感染率整體高于副溶血弧菌；從組織上分析，三種弧菌較肝臟、腎臟更易感染肌肉、脾臟；三種弧菌對(duì)不同魚齡的大黃魚感染率各不相同。研究還表明，三種弧菌在各個(gè)采樣時(shí)間點(diǎn)都有感染，其中7-9月為弧菌感染率高峰期，臺(tái)風(fēng)后的感染率較臺(tái)風(fēng)前都有一定提高；投喂不同餌料對(duì)三種弧菌感染大黃魚的

4、相關(guān)性并不強(qiáng)；弧菌平板分離培養(yǎng)結(jié)果與運(yùn)用多重 PCR技術(shù)在檢測(cè)方面表現(xiàn)出相似的感染趨勢(shì)，但前者的感染率較后者低。
　　根據(jù)大黃魚三種致病弧菌感染率與環(huán)境因子間的相關(guān)性分析可知：水溫與哈維弧菌及副溶血弧菌感染率表現(xiàn)出極顯著相關(guān)(P<0.01)，與溶藻弧菌感染率顯著相關(guān)(P<0.05)；水體中弧菌總數(shù)與哈維弧菌的感染率呈極顯著的正相關(guān)關(guān)系，與副溶血弧菌的感染率呈顯著相關(guān)關(guān)系，而其他環(huán)境因子與三種弧菌感染率相關(guān)性并不強(qiáng)。
　　另外