玉米幼苗水分脅迫誘導(dǎo)基因ZmCIPK1的克隆與功能分析.pdf

1、在高等植物體內(nèi)存在一類類似于酵母和動(dòng)物體內(nèi)鈣調(diào)磷酸酶B的蛋白，簡(jiǎn)稱CBL，它的靶蛋白是一類具有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的蛋白，被稱為CIPK(CBL-interactingproteinkinase)。最近的研究表明，CBLs與CIPKs家族可能在植物對(duì)逆境應(yīng)答的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中起重要作用。在我們實(shí)驗(yàn)室前期工作中，發(fā)現(xiàn)了一個(gè)受水分脅迫誘導(dǎo)表達(dá)的CIPK基因，暫時(shí)命名為ZmCIPK1，為了更好的理解ZmCIPK1在逆境應(yīng)答中的作用，我們首先利

2、用RACE和RT-PCR方法克隆到ZmCIPK1基因，擴(kuò)增cDNA全長(zhǎng)為1652bp，5'端非翻譯區(qū)36bp，編碼區(qū)1416bp，3'端非翻譯區(qū)200bp，推測(cè)ZmCIPK1編碼471個(gè)氨基酸，分子量為51KDa。利用生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)ZmCIPK1氨基酸序列分析發(fā)現(xiàn)ZmCIPK1蛋白N端22-282位是蛋白激酶區(qū)，其中22-113位是酪氨酸激酶區(qū)，C端是含有NAF結(jié)構(gòu)域和PPI結(jié)構(gòu)域的激酶調(diào)控區(qū)。亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè)表明該蛋白可能是一個(gè)質(zhì)膜蛋

3、白。Southern吸印/雜交表明ZmCIPK1在玉米基因組中以兩個(gè)copy形式存在。Northern吸印/雜交結(jié)果表明干旱、ABA、高鹽等逆境都誘導(dǎo)了ZmCIPK1表達(dá)量增加，而低溫條件下ZmCIPK1表達(dá)量沒(méi)有變化。植物在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中形成了一套非常完善的適應(yīng)不良環(huán)境的機(jī)制，同一信號(hào)刺激能引發(fā)不同的信號(hào)傳遞途徑，各信號(hào)途徑之間存在復(fù)雜的交叉轉(zhuǎn)導(dǎo)作用，所以在現(xiàn)有研究基礎(chǔ)上徹底弄清CBLs與CIPKs之間的相互關(guān)系，對(duì)于揭示植物逆境信