NOS和VEGF在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá).pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文NOS和VEGF在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)姓名：張瑩申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：尹菊20040401腺瘤7例，粘液『生囊腺瘤3例)，正常卵巢組織10例。標(biāo)本經(jīng)甲醛固定后常規(guī)石蠟包埋，4um厚連續(xù)切片。2主要試劑iNOS兔抗^、多克隆抗體、eNOS兔抗人多克隆抗體、vEGF兔抗人多克隆抗體及SABC試劑盒購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司，CD31鼠抗人單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)抗體診斷公司。3實(shí)驗(yàn)方法采用卵白素

2、～生物素(SABC)一過(guò)氧化酶免疫組織化學(xué)染色法。石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，3％過(guò)氧化氫滅活內(nèi)源性酶i0分鐘，高壓修復(fù)抗原后滴加正常山羊血清封閉液20分鐘，滴加適當(dāng)稀釋一抗4攝氏度冰箱過(guò)夜，滴加生物素化山羊抗兔IgG20分鐘，滴加SABC20分鐘，DAB顯色，蘇木素輕度復(fù)染，常規(guī)脫水、透明、封片。以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，以已知陽(yáng)性表達(dá)的腫瘤組織切片作陽(yáng)性對(duì)照。4結(jié)果判定iNOS、eNOS及VEGF的判定：陽(yáng)性細(xì)胞(細(xì)胞漿或細(xì)胞膜呈棕黃

3、或棕褐色者)≥1096的標(biāo)本則判定為陽(yáng)性。②~fvD的判定：先在低倍鏡下(100)全面觀察切片，尋找高血管密度區(qū)，然后在高倍視野內(nèi)(400)計(jì)數(shù)微血管的數(shù)目。以與周圍腫瘤細(xì)胞和結(jié)締組織成分明顯區(qū)別的任何一個(gè)棕色著色的內(nèi)皮細(xì)胞或細(xì)胞叢作為一個(gè)微血管，只要結(jié)構(gòu)不相連，其分枝結(jié)構(gòu)也作為一個(gè)血管計(jì)數(shù)，記錄5個(gè)視野內(nèi)的微血管數(shù)，取其平均值作為該例組織的MVD值。5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSSII0軟件進(jìn)行分析，對(duì)M舊的比較用t檢驗(yàn)，免疫反應(yīng)結(jié)果之間的關(guān)