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1、目的: 研究降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)扎模型表達(dá)的時(shí)空變化規(guī)律,探討其變化的意義。 方法: 健康成年SD大鼠99只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、假手術(shù)組和坐骨神經(jīng)結(jié)扎組,后者根據(jù)存活時(shí)間再分為1、3、5、7、14、21和28天組(各組n=11)。用原位雜交、免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)CGRP在坐骨神經(jīng)、脊神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglion,DRG
2、)和脊髓的表達(dá)變化;Western blot進(jìn)行定量測(cè)定。同時(shí)用免疫組織化學(xué)方法觀察NGF在坐骨神經(jīng)結(jié)扎部位的變化。 結(jié)果:(1).正常對(duì)照組大鼠DRG與脊髓前、后角神經(jīng)元內(nèi)均有CGRP mRNA表達(dá);CGRP蛋白質(zhì)表達(dá)主要分布于DRG感覺神經(jīng)元、脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元和后角Ⅰ、Ⅱ?qū)?。假手術(shù)組與正常對(duì)照組結(jié)果基本一致。(2).坐骨神經(jīng)結(jié)扎后術(shù)側(cè)DRG內(nèi)的CGRP mRNA表達(dá)5天開始下調(diào),持續(xù)至28天時(shí)仍低于正常;術(shù)后7天DRG內(nèi)C
3、GRP蛋白開始下降,28天仍低于正常,同時(shí)CGRP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目顯著減少(P<0.05)。Western blot檢測(cè)肯定了免疫染色的結(jié)果。(3).結(jié)扎后術(shù)側(cè)脊髓后角神經(jīng)元的CGRP mRNA表達(dá)7、14天下調(diào),21天時(shí)恢復(fù)正常;CGRP蛋白14天表達(dá)下降,21天時(shí)恢復(fù)正常。在脊髓前角,實(shí)驗(yàn)組和假手術(shù)組CGRP mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)差異沒有顯著性(9>0.05)。(4).結(jié)扎后1天坐骨神經(jīng)結(jié)扎近端CGRP大量堆積,至14天基本消失;結(jié)扎
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