脊髓水平星形膠質(zhì)細(xì)胞GAT-1在大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)扎致神經(jīng)病理性疼痛中的作用.pdf

1、目的:探討脊髓背角星形膠質(zhì)細(xì)胞GABA轉(zhuǎn)運體-1(γ-aminobutyric acid transporter-1.GAT-1)在大鼠坐骨神經(jīng)節(jié)扎致神經(jīng)病理性疼痛中的作用。 方法:第一部分，雄性SD大鼠隨機分為假手術(shù)組和坐骨神經(jīng)結(jié)扎組，在大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)扎損傷模型(chronic constriction injury,CCI)上，采用行為學(xué)、免疫熒光化學(xué)、共定位技術(shù)相結(jié)合的方法，檢測神經(jīng)病理性疼痛大鼠GAT-1、GFAP免疫陽

2、性細(xì)胞以及GAT-1與GFAP共定位在脊髓水平表達(dá)的變化；第二部分，CCI大鼠隨機分為前生理鹽水組、前NO-711組、后生理鹽水組、后NO-711組。利用鞘內(nèi)置管技術(shù)，應(yīng)用Von Frey細(xì)絲機械刺激和熱輻射刺激大鼠足底的方法，觀察鞘內(nèi)注射GAT-1抑制劑N0.711對神經(jīng)病理性疼痛大鼠機械縮足反射閾值(mechanical withdrawal threshold,MWT)、熱縮足反射潛伏期(thermal withdrawal la

3、tency，TWL)和運動功能的影響，用免疫熒光化學(xué)及共定位技術(shù)觀察鞘內(nèi)注射NO-711對脊髓背角GFAP免疫陽性細(xì)胞表達(dá)以及GAT-1與GFAP共定位的影響。 結(jié)果:第一部分，坐骨神經(jīng)結(jié)扎后1～28天，結(jié)扎組大鼠同側(cè)后足機械縮足反射閾值和熱縮足反射潛伏期與基礎(chǔ)值及假手術(shù)組比較均降低(P<0.01)。神經(jīng)結(jié)扎后1天，大鼠脊髓GFAP免疫陽性細(xì)胞表達(dá)增多，并持續(xù)到術(shù)后28天(P<0.01)。與基礎(chǔ)值及假手術(shù)組比較，從術(shù)后1天至術(shù)后

4、14天，CCI組大鼠脊髓背角GAT-1表達(dá)增加(P<0.01)，并于術(shù)后21天恢復(fù)基礎(chǔ)值水平。對于GAT-1與GFAP共定位，與基礎(chǔ)值及假手術(shù)組比較，從術(shù)后1天至術(shù)后14天，CCI組大鼠脊髓背角GAT-1與GFAP共定位明顯增加。第二部分，術(shù)前鞘內(nèi)注射NO-711明顯延遲CCI大鼠熱痛敏和機械痛敏的形成，其延遲效應(yīng)持續(xù)到術(shù)后7天。與術(shù)前生理鹽水組相比，術(shù)前NO-711組大鼠脊髓背角GFAP免疫陽性細(xì)胞表達(dá)明顯減少(P<0.01；P<0.

5、01)，在術(shù)后3、5天表現(xiàn)最為明顯；與術(shù)前生理鹽水組相比，從術(shù)后1天至術(shù)后7天，術(shù)前NO-711組大鼠脊髓背角GAT-1與GFAP共定位表達(dá)明顯增強。然而，術(shù)后鞘內(nèi)注射NO-711明顯抑制CCI大鼠已建立熱痛敏和機械痛敏，同時術(shù)后NO-711組大鼠脊髓背角GFAP免疫陽性細(xì)胞表達(dá)在給藥后的0.5h至4h明顯降低(P<0.01；P<0.01)；與ANS組相比，術(shù)后NO-711組大鼠脊髓背角GFAP與GAT-1共表達(dá)水平在在給藥后的0.5h