二月桂酸二丁基錫（DBTD）對(duì)雄性大鼠生殖內(nèi)分泌干擾作用機(jī)理探討.pdf

1、二月桂酸二丁基錫(Dibutyltin dilaurate，DBTD)是化學(xué)性質(zhì)活潑、中等毒性的有機(jī)錫化合物，主要用作聚氯乙烯塑料的穩(wěn)定劑。本實(shí)驗(yàn)室以往的研究發(fā)現(xiàn)，新出生Wistar。大鼠腹腔注射DBTD后，血清睪丸酮在一個(gè)月和三個(gè)月時(shí)檢測(cè)值都明顯偏高，并且雄鼠睪丸明顯增大，提示DBTD對(duì)大鼠的雄性激素水平和性器官產(chǎn)生了不可逆轉(zhuǎn)的影響。大鼠睪丸激素主要是由睪丸間質(zhì)細(xì)胞(Leydig細(xì)胞)合成和分泌的。睪丸間質(zhì)細(xì)胞分布在曲細(xì)精管間的結(jié)締組

2、織中，約占睪丸總重量的2％，但分泌的睪酮卻占睪酮總量的95％。本實(shí)驗(yàn)通過測(cè)定DBTD對(duì)睪酮合成過程中的三種關(guān)鍵酶(細(xì)胞色素P450側(cè)鏈裂解酶、細(xì)胞色素P450c17α酶和3β-羥類固醇脫氫酶)轉(zhuǎn)錄水平的影響，以及對(duì)與供能有關(guān)的酶的影響，從分子生物學(xué)水平探討其對(duì)雄性生殖功能產(chǎn)生內(nèi)分泌干擾的作用機(jī)理。 目的：本實(shí)驗(yàn)選用雄性wistar大鼠，應(yīng)用RT-PCR、分光光度法測(cè)定DBTD對(duì)睪酮合成過程中的三種限速酶轉(zhuǎn)錄水平的影響，探討D

3、BTD對(duì)大鼠睪酮合成過程的可能影響。 方法：將新出生的雄性wistar大鼠分為陰性對(duì)照組和1、0.1、0.01 mg/Kg/day三個(gè)劑量組，每組10只。將溶于玉米油的DBTD經(jīng)皮下注射染毒大鼠，每天一次，連續(xù)5天，染毒結(jié)束后繼續(xù)飼養(yǎng)至一個(gè)半月，斷頭處死，取其雙側(cè)睪丸，稱重，計(jì)算性器官指數(shù)，并應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、分光光度法檢測(cè)睪酮合成相關(guān)酶的合成及活性的改變。 結(jié)果：觀察發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組雄鼠相互攻擊

4、行為比溶劑對(duì)照組明顯，并且比較活潑。0.1mg/Kg/day劑量組的睪丸臟器系數(shù)高于溶劑陰性對(duì)照組，并且1mg/Kg/day劑量組與對(duì)照組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。各實(shí)驗(yàn)組食物利用率均低于溶劑對(duì)照組，并且0.1mg/Kg/day劑量組與對(duì)照組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。應(yīng)用分光光度法測(cè)定了大鼠睪丸中乳酸脫氫酶(LDH)、琥珀酸脫氫酶(SDH)、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)的活力改變，結(jié)果顯示：各實(shí)驗(yàn)組大鼠的LDH、SDH、G-6-PD活力與對(duì)照

5、組之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 應(yīng)用RT-PCR技術(shù)測(cè)定了大鼠睪酮合成過程中的三種關(guān)鍵酶轉(zhuǎn)錄水平的變化，結(jié)果顯示：各實(shí)驗(yàn)組3β-HSD的相對(duì)表達(dá)量與對(duì)照組之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；而P450scc、CYP17的相對(duì)表達(dá)量隨染毒劑量的增加，各實(shí)驗(yàn)組均有所增加，并且1mg/Kg/day劑量組的P450scc，0.1、1mg/Kg/day劑量組的CYP17相對(duì)表達(dá)量與對(duì)照組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論：二月桂酸二丁基錫可使雄性W