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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
應(yīng)用大鼠睪丸缺血再灌注模型,通過(guò)研究茶多酚對(duì)睪丸缺血再灌注損傷的保護(hù)作用,進(jìn)一步探討大鼠睪丸扭轉(zhuǎn)所導(dǎo)致生精功能損傷機(jī)制以及探索睪丸扭轉(zhuǎn)后藥物治療新方法。分組:
將32只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為4組,每組8只。其中第Ⅰ組大鼠切開(kāi)左側(cè)陰囊,使左側(cè)睪丸充分游離暴露,不予以扭轉(zhuǎn),模擬Turner法手術(shù)過(guò)程隨意搬動(dòng)睪丸,隨后縫合關(guān)閉陰囊;第Ⅱ組大鼠按Turner法制作睪丸扭轉(zhuǎn)模型:左側(cè)睪丸順時(shí)針繞精索旋
2、轉(zhuǎn)720°,肉膜白膜縫合固定以防止自動(dòng)復(fù)位,陰囊縫合,扭轉(zhuǎn)6h后復(fù)位固定;第Ⅲ組大鼠按上述相同方法制備睪丸扭轉(zhuǎn)模型,于睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位前30min(即睪丸扭轉(zhuǎn)后第5.5h)腹腔注射茶多酚(40mg/kg),第Ⅳ組大鼠制成睪丸扭轉(zhuǎn)模型后,扭轉(zhuǎn)復(fù)位前30min腹腔注射茶多酚(40mg/kg),同時(shí)在術(shù)后三天每天分別注射低劑量茶多酚(10mg/kg)維持。扭轉(zhuǎn)復(fù)位術(shù)后第5天切取左側(cè)睪丸分別留取組織勻漿和石蠟切片的標(biāo)本待檢測(cè)。
采用原
3、位脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的脫氧尿嘧啶三磷酸缺口末端標(biāo)記法(TUNEL法)測(cè)定凋亡細(xì)胞,凋亡細(xì)胞核呈棕褐色。將組織切片置于光學(xué)顯微鏡下觀察,每張切片均于20×10倍光鏡下隨機(jī)選擇5個(gè)視野進(jìn)行陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù),取其平均值用于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,求得陽(yáng)性細(xì)胞率即為凋亡指數(shù)(AI)?;瘜W(xué)比色法測(cè)定MDA含量及SOD活力,嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。
以上所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果以(x)±s表示,用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,采用方法:方差齊性檢驗(yàn)
4、、單因素方差分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。
結(jié)果:
1.按Turner法建立睪丸扭轉(zhuǎn)模型后,第Ⅱ組(睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組)大鼠所切除扭轉(zhuǎn)側(cè)睪丸明顯缺血萎縮,其與健側(cè)睪丸重量比較差異無(wú)顯著性(P>0.05);第Ⅲ、Ⅳ組扭轉(zhuǎn)側(cè)睪丸重量較健側(cè)睪丸重量差異無(wú)顯著性(P>0.05)。
2.第Ⅱ組(睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+茶多酚單次注射組)大鼠與第Ⅱ組(睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組)比較:SOD含量明顯升高,差異有顯著性(P<0.05)
5、;MDA含量明顯降低,差異有顯著性(P<0.01);生精細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯降低,差異有顯著性(P<0.01)。
3.第Ⅳ組(睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+茶多酚多次注射組)與第Ⅱ組(睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組)比較:SOD含量明顯升高,差異有顯著性(P<0.05);MDA含量明顯降低,差異有顯著性(P<0.01);生精細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯降低,差異有顯著性(P<0.01)。
4.第Ⅳ組(睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+茶多酚多次注射組)與第Ⅲ組(睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+
6、茶多酚單次注射組)比較:SOD活力,MDA含量以及生精細(xì)胞凋亡指數(shù)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
5.第Ⅰ組(假手術(shù)組)分別與第Ⅱ組、第Ⅲ組、第Ⅳ組比較:SOD含量明顯升高,MDA以及生精細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯下降,差異均具有顯著性(P<0.01)。
結(jié)論:
1.茶多酚可減輕大鼠睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位后的扭轉(zhuǎn)側(cè)睪丸組織損傷以及生精細(xì)胞凋亡。
2.茶多酚通過(guò)有效清除氧自由基、增強(qiáng)抗氧化酶活力這一途徑
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