大鼠胚胎胰腺巢蛋白的表達(dá)及早期胚胎胰腺顯微分離方法的建立.pdf

1、為了研究巢蛋白在內(nèi)分泌胰腺的發(fā)展的表達(dá),我們選擇了三個內(nèi)分泌胰腺發(fā)育的生物學(xué)的重要階段,胚胎18.5天、新生期、成年期,研究此三時期胰腺原因如下:(1)從三時期胰腺的HE、組化照片來看,在E18.5天,胰島已形成典型的形態(tài)結(jié)構(gòu),胰島體積較新生、成年小,胰島素陽性,著色淺,形態(tài)剛剛成熟,有insulin合成功能,處于功能前期狀態(tài).此時的胰島尚需要進(jìn)一步的分化成熟.(2)新生期胰腺的胰島體積、胰島素著色介與18.5天與成年間,內(nèi)外分泌部分均

2、已經(jīng)分化成熟,脫離母體開始接受外界的刺激,行使生物學(xué)內(nèi)外分泌功能,作為生理過渡時期,處于功能初期,還要進(jìn)一步完善.(3)、成年期的胰腺,胰島體積大,單位視野內(nèi)的胰島數(shù)少,胰島素著色最深,此時的內(nèi)外分泌處于分化成熟階段.三個時期代表胰腺發(fā)育過程中的功能前期、功能期和功能成熟期.通過研究胰腺干細(xì)胞的標(biāo)志蛋白——巢蛋白隨著胰腺的功能發(fā)育和完善過程中的表達(dá)、分布情況.了解巢蛋白在胚胎發(fā)育過程中有何趨勢,為探索胰腺β細(xì)胞的生長發(fā)育的調(diào)控提供客觀的

3、理論依據(jù).該課題通過RT-PCR和免疫組化方法,從核酸和蛋白水平著手,經(jīng)過相應(yīng)的統(tǒng)計分析,我們首次證明,巢蛋白在18.5天、新生期、成年期.在胰腺后期功能完善過程中,胰腺內(nèi)均有巢蛋白的表達(dá),主要定位在胰島和導(dǎo)管,在核酸和蛋白水平表達(dá)呈下降趨勢.統(tǒng)計顯示胰島內(nèi)的巢蛋白陽性細(xì)胞的百分比也呈下降趨勢.提示胚胎18.5天的胰腺干細(xì)胞多于新生、成年階段.胚胎后期取材的胰腺干細(xì)胞未見報道,這方面研究很值得進(jìn)一步深入研究.為了深入研究早期胚胎胰腺的生