白藜蘆醇對動脈粥樣硬化兔心肌組織凋亡途徑的影響.pdf

1、目的：高脂喂養(yǎng)新西蘭大白兔，建立動脈粥樣硬化(AS)兔模型，觀察Bax、Bcl-2在動脈粥樣硬化兔心肌組織中的表達(dá)及白藜蘆醇對其表達(dá)的干預(yù)作用；探討白藜蘆醇對動脈粥樣硬化兔心肌組織凋亡途徑的影響的可能的分子機(jī)制。 方法：健康雄性新西蘭大白兔70只，完全隨機(jī)分為5組：正常組(10只)以普通飼料喂養(yǎng)，病理組(18只)、白藜蘆醇低(14只)、中(14只)、高劑量組(14只)以高脂飼料喂養(yǎng)；白藜蘆醇低、中、高劑量組分別以低(4mg/kg

2、/d)、中(8mg/kg/d)、高(16mg/kg/d)劑量的白藜蘆醇溶于0.5％吐溫80溶液10ml灌胃，對照組和病理組則以0.5％吐溫80溶液10ml灌胃。連續(xù)喂養(yǎng)12周末處死動物，留取心尖部心肌組織。觀察心肌組織的病理形態(tài)學(xué)改變；TUNEL(即原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的切口末端標(biāo)記法)檢測組織標(biāo)本凋亡率；免疫組織化學(xué)染色方法檢測心肌組織BAX及BCL-2蛋白表達(dá)水平；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測組織標(biāo)本BaxmRN

3、A、Bcl-2mRNA、Caspase3mRNA、Caspase9mRNA的基因轉(zhuǎn)錄情況。SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析和t檢驗(yàn)，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1.高脂喂養(yǎng)12周后，兔動脈粥樣硬化模型成功建立。 2.心肌組織HE染色各組間病理形態(tài)學(xué)無顯著改變。 3.TUNEL顯示病理組細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著高于正常組、高于白藜蘆醇干預(yù)組(P<0.05)；白藜蘆醇干預(yù)組凋亡指數(shù)高于正常組(P<0.05)；白藜

4、蘆醇干預(yù)組間隨劑量的增長而降低(P<0.05)。 4.免疫組織化學(xué)染色方法檢測結(jié)果BAX蛋白、BCL-2蛋白正常組陽性細(xì)胞數(shù)較少，病理組BAX蛋白陽性細(xì)胞最多，白藜蘆醇干預(yù)組間，BAX及BCL-2蛋白陽性細(xì)胞存在劑量依賴性，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 5.病理對照BaxmRNA、Caspase3mRNA及Caspase9mRNA高表達(dá)(P<0.05)，正常組未見表達(dá)，白藜蘆醇干預(yù)組可抑制BaxmRNA、Caspas

5、e3mRNA及Caspase9mRNA的表達(dá)(P<0.05)，高劑量較低劑量抑制程度更大(P<0.05)。 6.正常組Bcl-2mRNA少量表達(dá)(P<0.05)，病理組及白藜蘆醇干預(yù)組Bcl-2mRNA表達(dá)明顯增高，白藜蘆醇干預(yù)組間隨劑量增加而增加(P<0.05)。 結(jié)論：白藜蘆醇可調(diào)節(jié)心肌組織的部分凋亡相關(guān)基因：降低AS兔的BaxmRNA、Caspase3mRNA及Caspase9mRNA的表達(dá)，升高Bcl-2mRNA