兔動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥—血管重塑機(jī)制探討.pdf

1、目的：⑴觀察脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)+高脂飲食兔AS模型主動(dòng)脈壁結(jié)構(gòu)及成分的變化。⑵探討AS炎癥-血管重塑可能機(jī)制。
　　 方法：通過皮下小劑量多次注射細(xì)菌脂多糖的方法，在高脂飼養(yǎng)的新西蘭白兔體內(nèi)引起慢性持續(xù)性炎癥反應(yīng)，以促進(jìn)兔主動(dòng)脈的血管病變，同時(shí)根據(jù)處理因素的不同將動(dòng)物分為A組（正常對(duì)照組5只）、B組（高脂飼養(yǎng)組10只）、C組(LPS組10只)和D組（高脂+LPS組10只），16周處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，

2、留取主動(dòng)脈標(biāo)本，10％中性甲醛固定，石蠟包埋。對(duì)不同處理組兔主動(dòng)脈蠟塊標(biāo)本切片，利用Masson染色法，觀察動(dòng)脈壁結(jié)構(gòu)及成分變化。同時(shí)采用酶聯(lián)免疫分析法(enzyme-linkedimmunoadsorbent assay，ELISA)測定各組兔于實(shí)驗(yàn)開始、8周初、12周初、16周處死前血清中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)、Ⅰ型膠原C末端肽（CTX-1）濃度，并計(jì)算MMP-9/TIMP-1值，

3、進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：①光鏡下，Masson染色結(jié)果平滑肌細(xì)胞呈紅色，膠原纖維呈綠色。正常組主動(dòng)脈各層結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)膜平整光滑，未見明顯泡沫細(xì)胞及炎細(xì)胞浸潤，內(nèi)彈力板完整;中膜平滑肌細(xì)胞排列整齊。高脂飼養(yǎng)組（B組）內(nèi)膜增厚，內(nèi)彈力板部分?jǐn)嗔?，?nèi)膜下可見脂質(zhì)沉積、數(shù)層多量泡沫細(xì)胞、少量炎細(xì)胞浸潤，可見少量平滑肌細(xì)胞遷移、膠原纖維沉積，中膜平滑肌細(xì)胞排列較整齊，可見平滑肌細(xì)胞少量增生。LPS組（C組）內(nèi)膜增厚，內(nèi)彈力板斷裂較B

4、組增多，內(nèi)膜下亦可見脂質(zhì)沉積、多量泡沫細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤，可見平滑肌細(xì)胞遷移，膠原纖維沉積，中膜平滑肌細(xì)胞排列較整齊，平滑肌細(xì)胞少量增生。高脂+LPS組(D組)內(nèi)膜明顯增厚，內(nèi)彈力板中斷甚至消失，內(nèi)膜下大量泡沫細(xì)胞、脂質(zhì)及炎細(xì)胞浸潤，可見多量平滑肌細(xì)胞、膠原沉積;中膜平滑肌細(xì)胞排列紊亂，中膜明顯萎縮，內(nèi)膜與中膜厚度比值(IT/MT)較A、B、C三組顯著升高，動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化較其他組更顯著。②B組兔血清MMP-9、TIMP-1、CTX-1濃

5、度及MMP-9/TIMP-1值在16周內(nèi)均升高，其中MMP-9濃度及MMP-9/TIMP-1值顯著升高;C組和D組16周內(nèi)MMP-9、TIMP-1、CTX-1濃度及MMP-9/TIMP-1值顯著升高;D組于8、12、16周時(shí)血清MMP-9、CTX-1濃度顯著高于A、B組，于16周末血清MMP-9、TIMP-1濃度顯著高于A、B、C三組。
　　 結(jié)論：⑴LPS可致MMP-9、TIMP-1、CTX-1濃度及MMP-9/TIMP-1值

6、顯著升高，高脂飲食可致MMP-9濃度及MMP-9/TIMP-1值顯著升高，高脂+LPS雙因素共同作用下MMP-9、TIMP-1值顯著高于單因素作用值。⑵高脂+LPS組主動(dòng)脈內(nèi)膜明顯增厚，內(nèi)彈力板中斷甚至消失，內(nèi)膜下大量炎細(xì)胞、泡沫細(xì)胞及脂質(zhì)浸潤，可見多量平滑肌細(xì)胞，膠原沉積，中膜平滑肌細(xì)胞排列紊亂，中膜明顯萎縮內(nèi)膜明顯增厚，動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化較其他組更顯著，證實(shí)了慢性感染性炎癥對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的形成及動(dòng)脈粥樣硬化血管重塑有一定的促進(jìn)作用。⑶慢

7、性炎癥反應(yīng)、高脂均能促使血管重塑，進(jìn)而影響動(dòng)物動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程，兩因素同時(shí)存在的情況下對(duì)機(jī)體的影響明顯增強(qiáng)，且炎癥反應(yīng)程度更強(qiáng)，氧化損傷更重，血管的形態(tài)變化更顯著，提示動(dòng)脈粥樣硬化危險(xiǎn)因素間有相互協(xié)同作用。⑷脂多糖慢性感染促進(jìn)了膠原代謝，進(jìn)而加重了動(dòng)脈粥樣硬化血管重塑。其可能機(jī)制為:炎癥反應(yīng)—炎細(xì)胞活化—釋放MMPs及炎癥因子—促使平滑肌細(xì)胞增殖、向內(nèi)膜遷移及表型轉(zhuǎn)化—加重炎癥反應(yīng)及進(jìn)一步促進(jìn)MMPs釋放—膠原合成降解失衡—血管重塑。