兔動脈粥樣硬化的炎癥—血管重塑機制探討.pdf

1、目的：⑴觀察脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)+高脂飲食兔AS模型主動脈壁結(jié)構(gòu)及成分的變化。⑵探討AS炎癥-血管重塑可能機制。
　　 方法：通過皮下小劑量多次注射細(xì)菌脂多糖的方法，在高脂飼養(yǎng)的新西蘭白兔體內(nèi)引起慢性持續(xù)性炎癥反應(yīng)，以促進(jìn)兔主動脈的血管病變，同時根據(jù)處理因素的不同將動物分為A組（正常對照組5只）、B組（高脂飼養(yǎng)組10只）、C組(LPS組10只)和D組（高脂+LPS組10只），16周處死實驗動物，

2、留取主動脈標(biāo)本，10％中性甲醛固定，石蠟包埋。對不同處理組兔主動脈蠟塊標(biāo)本切片，利用Masson染色法，觀察動脈壁結(jié)構(gòu)及成分變化。同時采用酶聯(lián)免疫分析法(enzyme-linkedimmunoadsorbent assay，ELISA)測定各組兔于實驗開始、8周初、12周初、16周處死前血清中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)、Ⅰ型膠原C末端肽（CTX-1）濃度，并計算MMP-9/TIMP-1值，

3、進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果：①光鏡下，Masson染色結(jié)果平滑肌細(xì)胞呈紅色，膠原纖維呈綠色。正常組主動脈各層結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)膜平整光滑，未見明顯泡沫細(xì)胞及炎細(xì)胞浸潤，內(nèi)彈力板完整;中膜平滑肌細(xì)胞排列整齊。高脂飼養(yǎng)組（B組）內(nèi)膜增厚，內(nèi)彈力板部分?jǐn)嗔眩瑑?nèi)膜下可見脂質(zhì)沉積、數(shù)層多量泡沫細(xì)胞、少量炎細(xì)胞浸潤，可見少量平滑肌細(xì)胞遷移、膠原纖維沉積，中膜平滑肌細(xì)胞排列較整齊，可見平滑肌細(xì)胞少量增生。LPS組（C組）內(nèi)膜增厚，內(nèi)彈力板斷裂較B

4、組增多，內(nèi)膜下亦可見脂質(zhì)沉積、多量泡沫細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤，可見平滑肌細(xì)胞遷移，膠原纖維沉積，中膜平滑肌細(xì)胞排列較整齊，平滑肌細(xì)胞少量增生。高脂+LPS組(D組)內(nèi)膜明顯增厚，內(nèi)彈力板中斷甚至消失，內(nèi)膜下大量泡沫細(xì)胞、脂質(zhì)及炎細(xì)胞浸潤，可見多量平滑肌細(xì)胞、膠原沉積;中膜平滑肌細(xì)胞排列紊亂，中膜明顯萎縮，內(nèi)膜與中膜厚度比值(IT/MT)較A、B、C三組顯著升高，動脈形態(tài)學(xué)變化較其他組更顯著。②B組兔血清MMP-9、TIMP-1、CTX-1濃

5、度及MMP-9/TIMP-1值在16周內(nèi)均升高，其中MMP-9濃度及MMP-9/TIMP-1值顯著升高;C組和D組16周內(nèi)MMP-9、TIMP-1、CTX-1濃度及MMP-9/TIMP-1值顯著升高;D組于8、12、16周時血清MMP-9、CTX-1濃度顯著高于A、B組，于16周末血清MMP-9、TIMP-1濃度顯著高于A、B、C三組。
　　 結(jié)論：⑴LPS可致MMP-9、TIMP-1、CTX-1濃度及MMP-9/TIMP-1值

6、顯著升高，高脂飲食可致MMP-9濃度及MMP-9/TIMP-1值顯著升高，高脂+LPS雙因素共同作用下MMP-9、TIMP-1值顯著高于單因素作用值。⑵高脂+LPS組主動脈內(nèi)膜明顯增厚，內(nèi)彈力板中斷甚至消失，內(nèi)膜下大量炎細(xì)胞、泡沫細(xì)胞及脂質(zhì)浸潤，可見多量平滑肌細(xì)胞，膠原沉積，中膜平滑肌細(xì)胞排列紊亂，中膜明顯萎縮內(nèi)膜明顯增厚，動脈形態(tài)學(xué)變化較其他組更顯著，證實了慢性感染性炎癥對動脈粥樣硬化的形成及動脈粥樣硬化血管重塑有一定的促進(jìn)作用。⑶慢

7、性炎癥反應(yīng)、高脂均能促使血管重塑，進(jìn)而影響動物動脈粥樣硬化的進(jìn)程，兩因素同時存在的情況下對機體的影響明顯增強，且炎癥反應(yīng)程度更強，氧化損傷更重，血管的形態(tài)變化更顯著，提示動脈粥樣硬化危險因素間有相互協(xié)同作用。⑷脂多糖慢性感染促進(jìn)了膠原代謝，進(jìn)而加重了動脈粥樣硬化血管重塑。其可能機制為:炎癥反應(yīng)—炎細(xì)胞活化—釋放MMPs及炎癥因子—促使平滑肌細(xì)胞增殖、向內(nèi)膜遷移及表型轉(zhuǎn)化—加重炎癥反應(yīng)及進(jìn)一步促進(jìn)MMPs釋放—膠原合成降解失衡—血管重塑。