P15基因、上皮鈣粘蛋白(E-cadherin)和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP10)在食管癌中的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、第一部分 目的:1.探討多種腫瘤抑制基因(P15基因)在食管鱗狀細(xì)胞癌(esophagealsauamous cell carcinoma)及癌旁正常組織中的表達(dá)情況,研究P15基因在食管鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。2.研究P15基因與食管癌發(fā)生的相關(guān)因素——吸煙或/和飲酒的關(guān)系。3.P15基因與臨床病理參數(shù)如臨床分期、組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤外浸的相關(guān)性,研究P15基因與食管癌惡性生物學(xué)行為及預(yù)后的關(guān)系。 方法

2、:取46例食管癌及癌旁正常組織標(biāo)本,應(yīng)用經(jīng)典的酚、氯仿法提取高分子量的基因組DNA,并對(duì)P15基因的外顯子1和外顯子2進(jìn)行PCR擴(kuò)增,以1.5%瓊脂糖凝膠電泳及溴化乙錠染色,分析PCR產(chǎn)物中P15基因的純合性缺失。 結(jié)果:食管癌旁正常粘膜中未見P15基因純合性缺失。食管癌組織中,P15基因的純合性缺失率為63.04%(29/46),其中外顯因子1缺失者15例,外顯因子2缺失者9例,兩個(gè)外顯因子均缺失者5例,占總?cè)笔Э倲?shù)的17.2

3、4%。P15基因缺失率在食管鱗狀細(xì)胞癌與癌旁正常組織中的差異呈顯著性(P<0.01)。P15基因純合性缺失在吸煙組、飲酒組、既吸煙也飲酒組分別為64.71%、64.52%、59.26%,而在不吸煙組、不飲酒組、既不吸煙也不飲酒組則分別為58.33%、60.00%、55.56%,統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著差異(P>0.05)。P15基因純合性缺失率在食管癌臨床分期Ⅰ-Ⅱ期及Ⅲ-Ⅳ期中分別為57.14%和 68.0%,統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著性差異(P>0.05

4、),有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組分別為53.33%和67.74%,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),腫瘤外浸組和無(wú)外浸組分別為60.0%和65.38%,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。P15基因缺失率與食管鱗狀細(xì)胞癌臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤外浸均無(wú)明顯相關(guān)性,統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)顯著性差異(P>0.05),而與食管癌組織學(xué)分級(jí)關(guān)系密切,差異呈顯著性(P<0.05)。P15基因純合性缺失率在食管癌DNA異倍體組和二倍體組分別為76.47%(26/34)

5、和25.0%(3/12),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論: 1.食管鱗狀細(xì)胞癌存在P15基因高頻率的純合性缺失,表明P15基因的純合性缺失參與了食管鱗狀細(xì)胞癌形成的分子機(jī)制,并在其發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。 2.吸煙或/和飲酒與P15基因純合性缺失關(guān)系不明顯(P>0.05),可以說(shuō),吸煙與飲酒在導(dǎo)致食管癌發(fā)生上,并不是由于通過(guò)使P15基因純合性缺失而起作用的。 3.P15基因純合性缺失與食管癌

6、組織學(xué)分級(jí)關(guān)系密切,同時(shí)與食管癌的DNA倍體水平密切相關(guān)。P15基因水平的檢測(cè),可了解食管癌的惡性生物學(xué)行為,有助于判斷其預(yù)后。 第二部分 目的:探討食管癌組織中上皮鈣粘蛋白(E-cadherin)和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP10)的表達(dá)情況,研究二種指標(biāo)與食管癌的臨床分期、組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤外侵及性別、年齡的關(guān)系。 方法:免疫組化法研究46例食管癌及癌旁正常組織中E-cadherin和MMP10的表達(dá)情

7、況,并與食管癌的生物學(xué)行為進(jìn)行比較。 結(jié)果:與癌旁正常粘膜組織相比,食管癌組織中E-cadherin的表達(dá)明顯減弱(p<0.01);食管癌旁正常粘膜中未見MMP10表達(dá),食管癌組織中MMP10陽(yáng)性表達(dá)率為34.78%(16/46),明顯高于癌旁正常食管粘膜組織(p<0.05)。E-cadherin的表達(dá)強(qiáng)度與食管癌的組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期和腫瘤外侵密切相關(guān)(p<0.05)。MMP10的表達(dá)強(qiáng)度與食管癌組織分級(jí)呈正相關(guān)(r

8、=0.29774,p<0.05),與臨床分期呈正相關(guān)(r=0.39010,p<0.01),同時(shí)與食管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤外侵密切相關(guān),統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(p<0.05)。 結(jié)論: 1.食管癌組織中El-cadherin的表達(dá)明顯減弱,且與食管癌組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期及腫瘤外侵關(guān)系密切,表明E-cadherin與食管癌的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)、生長(zhǎng)和粘附有關(guān),可做為一個(gè)重要的腫瘤標(biāo)記物。 2.MMPlO在食管癌的表達(dá)強(qiáng)度與

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