ET-1引起熱痛覺過敏與瘙癢機(jī)制研究.pdf

1、目的：ET-1（endothelin-1, ET-1）是1988年日本學(xué)者從豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一種具有強(qiáng)烈收縮血管的多肽。ET-1通過作用在G蛋白偶聯(lián)受體(G protein coupled receptor，GPCR)發(fā)揮作用，即ETA和ETB受體。ET-1皮下注射引起熱痛覺過敏和瘙癢，兩者是否通過相同還是不同初級(jí)神經(jīng)纖維傳入，目前仍不明確。我們使用大鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，探討ET-1引起熱痛覺過敏和瘙癢分子機(jī)制及其可能存在的聯(lián)系。激

2、活的ETB受體通過κ受體和NOS（nitric oxide synthase）發(fā)揮鎮(zhèn)痛、止癢過程，而皮膚本身存在這些受體，通過激活皮膚細(xì)胞這些受體后檢測(cè)一氧化氮(nitrite oxide，NO)分泌量確定是否具有自分泌抗傷害作用。
　　方法：選擇雄性SD大鼠，體重180-220g，分組處理，每組6-9只大鼠，每只實(shí)驗(yàn)大鼠只使用一次。采用大鼠足底和臉頰皮下注射ET-1（10μM）分別誘導(dǎo)產(chǎn)生熱痛覺過敏和瘙癢，通過與PKC抑制劑Bi

3、sindolylmaleimideⅠ（BIM）、PLC抑制劑U73122、PC-PLC抑制劑D609、PKA抑制劑H89和非選擇性NOS抑制劑L-NAME共同注射探索它們的傳導(dǎo)通路。培養(yǎng)的人角質(zhì)形成細(xì)胞經(jīng)過ETB和κ受體激動(dòng)劑處理后檢測(cè)產(chǎn)生NO量。
　　結(jié)果：
　　1、 ET-1引起熱痛覺過敏作用
　　足底注射ET-1可明顯降低熱痛覺敏感閾值。ETA受體特異性拮抗劑BQ123與ET-1共同足底注射能完全阻斷ET-1引起

4、的熱痛覺過敏（P<0.01），而ETB受體特異性拮抗劑BQ788（1 mM）對(duì)熱痛覺閾值沒有影響（P>0.05）。PLC抑制劑U73122、PKC抑制劑BIM與ET-1共同注射后顯著抑制ET-1引起的熱痛閾的降低（P<0.01）。而PC-PLC抑制劑D609和PKA抑制劑H89與ET-1共同注射不能扭轉(zhuǎn)ET-1引起的熱痛覺過敏（P>0.05）。
　　2、 ET-1引起瘙癢作用
　　大鼠左側(cè)臉頰皮下注射ET-1產(chǎn)生明顯的搔抓行

5、為，BQ123與ET-1共同皮下注射能阻斷ET-1產(chǎn)生的瘙癢（P<0.01），而BQ788共同注射卻增加大鼠搔抓次數(shù)（P>0.05）。PKC抑制劑BIM和PLC抑制劑U73122與ET-1共同大鼠皮下注射抑制ET-1引起的搔抓行為（P<0.01）。而PC-PLC抑制劑D609和PKA抑制劑H89與ET-1則不能抑制ET-1引發(fā)的搔抓行為（P>0.05）。
　　3、NO不參與ET-1引起的熱痛覺過敏和瘙癢過程
　　非選擇NOS