胰島素抵抗KKAy小鼠組織LRP16基因表達的實驗研究.pdf

1、目的：檢測人白血病相關(guān)蛋白16（LeukemiaRelatedProtein16，LRP16）在KKAy小鼠和C57小鼠胰腺、脂肪、肝臟、骨骼肌組織中的表達，觀察小鼠在高脂飲食和遺傳因素所致胰島素抵抗對LRP16在各種組織的表達影響及其在TZDs(Thiazolidinediones)藥物干預下的變化。探討在胰島素抵抗與小鼠各種胰島素抵抗相關(guān)組織中LRP16表達變化的相關(guān)性。
　　方法：1.以KKAy小鼠和C57小鼠為實驗對象給予

2、高脂飲食飼養(yǎng)、普通飲食及高脂飲食加鹽酸吡咯列酮飼養(yǎng)，根據(jù)胰島素及血糖水平篩選胰島素抵抗動物模型。2.ELISA(Enzymelinkedimmunosorbentassay)法檢測動物模型血清胰島素（Insulin）、腫瘤壞死因子α（TumorNecrosisFactoralpha,TNFα）、白介素（Interleukin,IL）-6。3.免疫組織化學法檢測動物胰腺、脂肪、肝臟、骨骼肌組織中LRP16的表達。4.Western-Blo

3、t法檢測動物胰腺、脂肪、肝臟、骨骼肌組織中LRP16的表達。5.Q-PCR（Real-timeQuantitativePCR）法檢測動物胰腺、脂肪、肝臟、骨骼肌組織中LRP16mRNA。
　　結(jié)果：1.實驗動物各項指標比較：1）體重：高脂喂養(yǎng)KKAy組與吡咯列酮喂養(yǎng)組體重差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），其余各組體重均有顯著性差異（P<0.01）。2）空腹血糖：C57普通喂養(yǎng)組與C57高脂喂養(yǎng)組差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），吡

4、咯列酮喂養(yǎng)KKAy組與普通喂養(yǎng)KKAy組比較空腹血糖差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），其余各組空腹血糖均有顯著性差異（P<0.01）。3）隨機血糖：C57普通喂養(yǎng)組與C57高脂喂養(yǎng)組差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），吡咯列酮喂養(yǎng)KKAy組與普通喂養(yǎng)KKAy組比較隨機血糖差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），其余各組隨機血糖均有顯著性差異（P<0.01）。4）空腹胰島素：吡咯列酮喂養(yǎng)KKAy組與普通喂養(yǎng)KKAy組比較空腹胰島素差異無統(tǒng)計學意義

5、（P>0.05），其余各組空腹胰島素均有顯著性差異（P<0.01）。5）HOMA-IR：吡咯列酮喂養(yǎng)KKAy組與普通喂養(yǎng)KKAy組HOMA-IR比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），其余各組HOMA-IR比較均有顯著性差異（P<0.01）。6）IL-6：吡咯列酮喂養(yǎng)KKAy組與普通喂養(yǎng)C57組、高脂喂養(yǎng)C57組IL-6比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），其余各組IL-6比較均有顯著性差異（P<0.01）。7）TNF-α：吡咯列酮喂養(yǎng)K

6、KAy組與普通喂養(yǎng)C57組、高脂喂養(yǎng)C57組TNFα比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），其余各組TNFα比較均有顯著性差異（P<0.01）。2.IL-6和TNF-α與C57小鼠體重成正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.677（P<0.01）,0.534(P<0.01)；IL-6和TNF-α與KKAy小鼠體重成正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.755（P<0.01）,0.495(P<0.01)。3.各組動物胰腺、脂肪、肝臟、骨骼肌組織可見LRP16染色，半定量分

7、析IOD值存在差異（詳見各部分內(nèi)容）。4.Western-blot檢測LRP16在胰腺、脂肪、肝臟、骨骼肌組織有表達，各組相對表達量存在差異（詳見各部分內(nèi)容）。5.Q-PCR檢測LRP16mRNA的相對表達量存在差異（詳見各部分內(nèi)容）。
　　結(jié)論：C57小鼠和KKAy小鼠胰腺、脂肪、肝臟、骨骼肌組織中存在LRP16基因表達，高脂飲食和遺傳因素引起胰島素抵抗發(fā)生時LRP16表達水平顯著升高，TZDs(Thiazolidinedion