新生小鼠不同途徑感染MCMV聽力損傷及內(nèi)耳病理變化的比較研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:分別經(jīng)大腦、內(nèi)耳、腹腔3個不同部位接種小鼠巨細胞病毒(murinecytomegalovirus,MCMV),建立MCMV感染一聽力損傷的BALB/C小鼠動物模型,同時應用更昔洛韋(ganciclovir,GCV)干預,通過腦干聽覺誘發(fā)電位(auditorybrainstem response,ABR)和內(nèi)耳前庭、蝸管相關結構免疫炎癥病理變化的比較,以明確哪種感染方式建立動物模型能夠引起相對較明顯的聽力損傷及內(nèi)耳病理變化,為今后巨

2、細胞病毒感染-聽力損傷發(fā)病機制及新的治療藥物的研究提供理想的研究平臺。
   方法:新生BALB/C小鼠根據(jù)MCMV接種部位的不同,按窩隨機分為腦內(nèi)組、內(nèi)耳組(均取左側耳為接種操作耳)、腹腔組3組,其中每組平行設正常對照組(接種部位注射10μl無菌NS)、病毒組(接種部位注射TCID50為104.31/0.1ml的MCMV病毒懸液10μl)、治療組3個亞組(MCMV接種方法同病毒組,接種MCMV后第2d天始,腹腔注射GCV60m

3、g/kg.d,連用2w),每組8只(內(nèi)耳組中的各個亞組每組16只)。GCV治療2w后,在聲電屏蔽下檢測小鼠ABR,然后將小鼠斷頭處死,取出兩側聽泡,分別提取MCMV-DNA、石蠟切片后,行PCR分析和組織病理學觀察。
   結果:
   1.經(jīng)腦內(nèi)接種MCMV病毒組小鼠,內(nèi)耳MCMV-DNA PCR電泳均出現(xiàn)陽性條帶;經(jīng)內(nèi)耳接種MCMV病毒組小鼠接種MCMV耳內(nèi)耳異亦出現(xiàn)陽性條帶,而對側耳未見陽性結果;經(jīng)腹腔接種MCMV

4、病毒組小鼠亦未見陽性結果。另外,經(jīng)腦內(nèi)、內(nèi)耳接種MCMV治療組內(nèi)耳(內(nèi)耳接種途徑為接種MCMV耳)陽性條帶亮度與病毒組相比變?nèi)酢?br>   2.經(jīng)腦內(nèi)接種MCMV病毒組、經(jīng)內(nèi)耳接種MCMV病毒組(接種MCMV耳)小鼠與正常對照組相比,ABRⅠ波潛伏期延長、波幅降低(P<0.05),差異存在統(tǒng)計學意義,而內(nèi)耳接種方式接種MCMV耳對側耳(P>0.05),差異無統(tǒng)計學意義;經(jīng)腹腔接種MCMV病毒組與正常對照組相比(P>0.05),差異無

5、統(tǒng)計學意義。另外,經(jīng)腦內(nèi)、內(nèi)耳接種MCMV治療組(內(nèi)耳接種途徑為接種MCMV耳)與病毒組相比,ABRⅠ波潛伏期縮短、波幅升高(P<0.05),差異存在統(tǒng)計學意義。
   3.經(jīng)腦內(nèi)接種MCMV病毒組、經(jīng)內(nèi)耳接種MCMV病毒組(接種MCMV耳)小鼠與正常對照組相比,內(nèi)耳前庭膜明顯增厚伴有較多的淋巴細胞浸潤、蝸管頂部分泌表皮層纖維化改變明顯,而內(nèi)耳接種方式接種MCMV耳對側耳前庭膜與蝸管未出現(xiàn)上述病理變化;經(jīng)腹腔接種MCMV病毒組與

6、正常對照組相比,亦未出現(xiàn)上述類似的前庭膜與蝸管的病理變化。另外,經(jīng)腦內(nèi)、內(nèi)耳接種MCMV治療組(內(nèi)耳接種途徑為接種MCMV耳)與病毒組相比,前庭膜與蝸管亦無上述明顯組織病理改變。
   結論:
   1.腦內(nèi)接種MCMV可引起雙側內(nèi)耳MCMV感染并誘發(fā)炎癥反應。
   2.腦內(nèi)接種MCMV可導致雙側耳明顯的聽力損傷。
   3.GCV可通過抑制內(nèi)耳CMV復制從而減輕其對內(nèi)耳的損害,而對聽力損傷的惡化起到一

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