趨化因子受體CXCR4阻斷劑11CH3-O-AMD-3207肺癌放射顯像的實驗研究.pdf

1、目的：⑴研究A549、H1299和GLC-82三株肺癌細(xì)胞CXCR4表達(dá)情況；研究體外情況下趨化因子受體CXCR4阻斷劑11CH3-O-AMD-3207在A549、H1299和GLC-82三株肺癌細(xì)胞株的攝取情況；⑵研究體內(nèi)情況下11CH3-O-AMD-3207在A549荷瘤小鼠肺癌實驗?zāi)Ｐ透鱾€臟器的分布狀況；研究以11CH3-O-AMD-3207作為示蹤劑A549荷瘤小鼠肺癌實驗?zāi)Ｐ蚉ET-CT顯像情況；⑶對比研究11CH3-O-AM

2、D-3207與18F-FDG、18F-FLT在荷瘤小鼠及炎癥小鼠體內(nèi)分布及顯像的差異。
　　方法：⑴應(yīng)用RT-PCR方法檢測A549、H1299和GLC-82三株肺癌細(xì)胞CXCR4的表達(dá)情況；細(xì)胞培養(yǎng)至理想狀態(tài)，將11CH3-O-AMD-3207分布加入A549、H1299和GLC-82三株肺癌細(xì)胞，于不同時間點(diǎn)收集細(xì)胞并檢測放射性攝取活度；分析A549、H1299和GLC-82三株肺癌細(xì)胞CXCR4表達(dá)與11CH3-O-AMD-

3、3207攝取的關(guān)系；⑵研究11CH3-O-AMD-3207在正常NH小鼠體內(nèi)的生物分布；建立A549肺癌細(xì)胞株荷瘤小鼠模型，注射11CH3-O-AMD-3207后于不同時間點(diǎn)進(jìn)行PET-CT顯像。于不同時間點(diǎn)分別采集荷瘤小鼠心、肝、脾、肺、腎、肌肉、骨骼和腫瘤組織，測定各臟器組織放射性攝取水平，研究11CH3-O-AMD-3207在各種組織或臟器的生物分布狀況。⑶選取18F-FDG和18F-FLT作為對照，取A549荷瘤小鼠為實驗對象，

4、分別注入11CH3-O-AMD-3207、18F-FDG和18F-FLT，行PET-CT掃描，觀察其顯像的差異；解剖實驗小鼠，分別采集荷瘤小鼠各重要臟器組織標(biāo)本，測定其放射性攝取水平，研究其生物分布狀況，比較三種示蹤劑在荷瘤小鼠的分布差異。⑷構(gòu)建炎癥小鼠實驗?zāi)Ｐ?，分別將11CH3-O-AMD-3207、18F-FDG和18F-FLT三種示蹤劑注入炎癥小鼠體內(nèi)，行PET-CT掃描，觀察其顯像的差異；解剖實驗小鼠，分別采集炎癥小鼠各重要臟器

5、組織標(biāo)本，測定其放射性攝取水平，研究其生物分布狀況，比較三種示蹤劑在炎癥小鼠的分布差異。
　　結(jié)果：⑴A549、H1299和GLC-82三株肺癌細(xì)胞都存在CXCR4表達(dá)，三株肺癌細(xì)胞間的表達(dá)水平存在差異。表達(dá)水平由高到低依次為：A549、GLC-82和H1299。在體外條件下，三種肺癌細(xì)胞對11CH3-O-AMD-3207均有攝取，其攝取高峰在注藥后15分鐘。三株細(xì)胞攝取11CH3-O-AMD-3207的程度不同，由高到低依次為：

6、A549、GLC-82和H1299。11CH3-O-AMD-3207與CXCR4的結(jié)合位點(diǎn)與AMD3100相同，兩者的結(jié)合具有特異性。三株肺癌細(xì)胞攝取11CH3-O-AMD-3207的濃度與CXCR4的表達(dá)水平有明顯的相關(guān)性。體外條件下肺癌細(xì)胞對11CH3-O-AMD-3207的攝取存在特異性。⑵正常NH小鼠攝取11CH3-O-AMD-3207的主要臟器為肝、脾、腎，在實驗的各個時間點(diǎn)，肝臟及腎臟均維持較高的放射性攝取水平，但肺攝取11

7、CH3-O-AMD-3207的水平在各個時間點(diǎn)均普遍偏低。注藥后30～45分鐘，A549荷瘤小鼠腫瘤PET顯像明顯，且與CT掃描圖像一致。注藥后30分鐘，腫瘤與肌肉及骨骼的T/NT均大于2倍；注藥后45分鐘，腫瘤與肌肉組織的T/NT大于2倍。注藥后15、30、45分鐘三個時間點(diǎn)，腫瘤與肺的T/NT均大于2倍。⑶11CH3-O-AMD-3207組腫瘤與血液、心臟、脾臟、肺及肌肉的T/NT值均大于2倍；18F-FDG組腫瘤與血液、肝臟、脾臟

8、及肌肉的T/NT值均大于2倍；18F-FLT組腫瘤與血液、心臟、肺及肌肉的T/NT值均大于2倍。18F-FDG組與11CH3-O-AMD-3207組的腫瘤對心、肝、脾、腎的T/NT值存在顯著性差異；18F-FLT組與11CH3-O-AMD-3207組的腫瘤對血、肝、腎的T/NT值存在顯著性差異。⑷11CH3-O-AMD-3207組炎癥組織與血、肌肉的T/NT值均小于2倍；18F-FDG組炎癥組織與血、肌肉的T/NT值均大于2倍；18F-

9、FLT組炎癥組織與血、肌肉的T/NT值均小于2倍。18F-FDG組與11CH3-O-AMD-3207組的炎癥/血、炎癥/肌肉比值存在顯著性差異；18F-FLT組與11CH3-O-AMD-3207組的炎癥/血、炎癥/肌肉比值無顯著性差異。
　　結(jié)論：⑴11C標(biāo)記的趨化因子受體CXCR4阻斷劑CH3-O-AMD-3207化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定可靠，與CXCR4的結(jié)合具有特異性；⑵對于CXCR4表達(dá)陽性的腫瘤，11CH3-O-AMD-3207是一