薔薇科植物病毒研究--4種病毒的分子鑒定及檢測(cè)技術(shù)研究.pdf

1、本文對(duì)浙江、山東、遼寧等地的薔薇科主要經(jīng)濟(jì)植物上的主要病毒進(jìn)行了檢測(cè)和分子鑒定，比較了該科植物中的主要病毒李壞死環(huán)斑病毒(PNRSV)、蘋果莖溝病毒(ASGV)、蘋果花葉病毒(ApMV)和洋李矮縮病毒(PDV)分離物的序列同源性、血清型和種內(nèi)進(jìn)化關(guān)系，初步研究了應(yīng)用玻片雜交技術(shù)來(lái)檢測(cè)該科植物上以上病毒的發(fā)生概況。　 通過RT-PCR方法獲得8個(gè)PNRSV分離物(PNRSV-C4、PNRSV-CTA、PNRSV-C3、PNRSV-C91

2、5、PNRSV-A1、PNRSV-A2、PNRSV-P、PNRSV-R)的CP基因序列，PNRSV-P分離物CP基因核苷酸序列長(zhǎng)度為675bp，其它7個(gè)分離物CP基因核苷酸序列長(zhǎng)度為681bp。所獲得分離物與54個(gè)其它地區(qū)的分離物進(jìn)行同源性分析、血清型分析和系統(tǒng)進(jìn)化樹分析?！　⊥ㄟ^RT-PCR方法從蘋果上獲得2個(gè)ASGV分離物和一個(gè)ApMV分離物，分別命名為ASGV-A1、ASGV-A2和ApMV-A。對(duì)不同地區(qū)來(lái)源、不同寄主來(lái)源的1

3、2個(gè)ASGV分離物進(jìn)行CP基因核苷酸和氨基酸序列進(jìn)行同源性比較，核苷酸序列的同源性為90.2％～100％，氨基酸序列同源性為94.1％～100％。ASGV-A1和ASGV-A2與巴西的分離物UV01之間的核苷酸序列和氨基酸序列同源性最高，核苷酸序列同源性分別為分別為99.2％和99.6％，氨基酸同源性分別為99.6％和100％，應(yīng)該是同一病毒株起源的?！　⊥ㄟ^RT-PCR方法從大連甜櫻桃上獲得1個(gè)PDV分離物(PDV-DL)。采用DN