CD133+CXCR4+結(jié)直腸癌腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性及對(duì)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、目的:觀察結(jié)直腸癌及其肝轉(zhuǎn)移癌組織中CD133、CXCR4的表達(dá)情況,明確CD133+CXCR4+細(xì)胞在結(jié)直腸癌組織及其細(xì)胞系HCT116中的細(xì)胞含量,探究CD133+CXCR4+結(jié)直腸癌腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性。
　　方法:應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測結(jié)直腸癌及其肝轉(zhuǎn)移癌組織標(biāo)本的CD133、CXCR4的表達(dá)情況。運(yùn)用FACSAria流式細(xì)胞儀檢測結(jié)直腸癌及其肝轉(zhuǎn)移癌組織標(biāo)本、結(jié)直腸癌細(xì)胞株HCT116中CD133+細(xì)胞、CXCR4+細(xì)胞

2、及CD133+CXCR4+細(xì)胞的細(xì)胞含量。對(duì)結(jié)直腸HCT116細(xì)胞株細(xì)胞進(jìn)行FACSAria流式細(xì)胞儀分選,分選出CD133+及CD133-細(xì)胞,利用FACSAria流式細(xì)胞儀對(duì)此二類細(xì)胞的CXCR4+表型細(xì)胞含量進(jìn)行檢測并分別進(jìn)行成球培養(yǎng)實(shí)驗(yàn);分選出的CD133+CXCR4+、CD133+CXCR4-、CD133-CXCR4+、CD133-CXCR4-四類細(xì)胞于體外進(jìn)行5-FU藥敏MTT實(shí)驗(yàn)、克隆形成實(shí)驗(yàn)以及遷移侵襲實(shí)驗(yàn)。
　　

3、結(jié)果:(1)免疫組織化學(xué)法檢測結(jié)果顯示結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶組織中CXCR4表達(dá)率高于原發(fā)灶(P=0.032)。
　　(2)FACSAria流式細(xì)胞儀分析檢測結(jié)果顯示肝轉(zhuǎn)移灶組織中CD133+CXCR4+細(xì)胞率高于癌旁組織及原發(fā)灶組織(P<0.001,P=0.014)。
　　(3)經(jīng)FACSAria流式細(xì)胞儀分選檢測,CD133+細(xì)胞中CXCR4+細(xì)胞比率高于CD133-細(xì)胞(P<0.001),CD133+細(xì)胞成球所需細(xì)胞濃度低于

4、CD133-細(xì)胞(P=0.01)并且CD133+細(xì)胞成球所需時(shí)間短于CD133-細(xì)胞(P=0.002)。
　　(4)MTT藥敏實(shí)驗(yàn)及克隆形成實(shí)驗(yàn)分別顯示CD133+細(xì)胞較CD133-細(xì)胞耐藥能力及增殖能力強(qiáng)(P<0.001,P<0.001)。遷移侵襲實(shí)驗(yàn)顯示CD133+CXCR4+細(xì)胞具有很強(qiáng)的遷移、侵襲能力。
　　結(jié)論:(1)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶組織中CXCR4表達(dá)率高于原發(fā)灶組織。
　　(2)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶組織中CD