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1、目的:通過正交實驗優(yōu)選出二色補血草總黃酮的最佳提取工藝,建立大孔吸附樹脂分離純化二色補血草總黃酮的實驗方法,并建立總黃酮的含量測定方法。初步確定了二色補血草總黃酮標準提取物質(zhì)量標準。最后對二色補血草總黃酮和二色補血草水煎劑進行了出凝血實驗和對性激素影響實驗的比較。 方法:以蘆丁為對照品,采用鋁鹽絡(luò)合比色法,用UV-1100分光光度計確定二色補血草總黃酮含量測定方法。采用L9(43)正交實驗設(shè)計,以總黃酮含量為指標,考察乙醇用量,
2、回流時間,回流次數(shù),乙醇濃度四個因素對二色補血草總黃酮提取率的影響,確定最佳提取工藝??疾霥-101大孔吸附樹脂對二色補血草總黃酮的吸附和洗脫條件,確定了總黃酮的分離純化工藝。初步建立了二色補血草總黃酮標準提取物的質(zhì)量標準。采用水煎劑大中小劑量,總黃酮大中小劑量和生理鹽水共7組對比了對小鼠出凝血時間的影響,將去勢雌性大鼠分成陰性對照組(生理鹽水),陽性對照組(宮血寧),總黃酮組,水煎液大,中,小劑量組,以促卵泡素(FSH)、促黃體素(L
3、H)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的變化為指標,考察了總黃酮和水煎液對促卵泡素(FSH)、促黃體素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的影響。 結(jié)果:應(yīng)用比色法建立了二色補血草總黃酮含量測定的實驗條件,得到回歸直線方程為y=1.366680x-0.009568,r=0.9999。y為吸光度,x為蘆丁濃度(mg/ml)。線性范圍為:0.1025mg/ml~0.6150mg/ml??傸S酮最佳提取工藝為料液比為1:10,濃度為60%的乙
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