中華補(bǔ)血草多酚抗氧化活性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、中華補(bǔ)血草(Limonium sinense(Girard) Kuntze)是白花丹科藥用植物,主產(chǎn)于我國(guó)沿海鹽堿地。根可供入藥,具祛濕、清熱、止血等功效,藥效確切。本文以中華補(bǔ)血草為材料,開展以下幾個(gè)方面的研究。 1.采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化超聲波輔助浸提中華補(bǔ)血草根多酚工藝,確定的最佳工藝參數(shù):乙醇體積分?jǐn)?shù)45010、液固比38:1、溫度65℃,在此條件下根多酚提取率9.71%。 2.從5種不同類型的大孔樹脂中篩選出對(duì)中

2、華補(bǔ)血草根多酚有良好吸附及解吸性能的AB-8大孔樹脂,系統(tǒng)考察了該樹脂對(duì)多酚吸附和解吸的影響因子,確定的最佳靜態(tài)吸附條件:提取液初始質(zhì)量濃度約2.4 mg.mL-1,吸附時(shí)間約5h,提取液pH值可不調(diào)節(jié);最佳動(dòng)態(tài)解吸條件:體積分?jǐn)?shù)70%乙醇為沈脫劑,流速1.0 mL.min-1。在此條件下制備的根多酚提取物,得率和純度分別為12.88%、59.29%。 3.采用Sephadex LH-20柱層析對(duì)大孔樹脂法制備的根多酚進(jìn)行純化,

3、根據(jù)洗脫液在280 nm和360 nm處的沈脫曲線圖分得6個(gè)級(jí)分,其中FracⅥ得牢最高,占純化產(chǎn)物的80.09%,且FracⅣ、FracⅥ、FracⅤ和FracⅡ中的多酚純度比純化前均有所提高,F(xiàn)racⅣ達(dá)66.91%,達(dá)到純化目的。 4.分別采用8種體外試驗(yàn)體系(包括還原能力、FRAP法、·OH體系、·O2體系、DPPH法、TEAC法、β-胡蘿卜素/亞油酸脂質(zhì)體體系和大豆卵磷脂脂質(zhì)體體系)對(duì)中華補(bǔ)血草根多酚提取物及其6個(gè)級(jí)分

4、的抗氧化活性進(jìn)行了系統(tǒng)評(píng)價(jià)。 根多酚提取物及FracⅣ、FracⅤ等2個(gè)級(jí)分具有很強(qiáng)的還原能力(供電子能力),顯著高于對(duì)照品蘆丁,與BHT相當(dāng),但低于VitC。 根多酚提取物對(duì)·OH和·O2等自由基的清除能力很強(qiáng),半數(shù)清除率質(zhì)量濃度(Picso)分別為0.061 mg·mL-1、0.022 mg·mL-1,清除能力強(qiáng)于蘆丁和VitC,6個(gè)級(jí)分中僅富含黃酮的FracII對(duì)·OH的清除能力有顯著提高,其余級(jí)分與純化前差異不顯

5、著或較之低:而對(duì)·O2-的清除能力卻有所不同,6個(gè)級(jí)分中活性最強(qiáng)的兩個(gè)級(jí)分( FracⅣ、FracⅤ)比純化前略低,原因可能是清除·O2能力強(qiáng)的物質(zhì)部分殘留在Sephadex LH-20凝膠中所致。根多酚提取物及FracIV、FracV等級(jí)分具有很強(qiáng)的有機(jī)自由基(DPPH.、ABTS.+)清除能力,均高于BHT、蘆丁,比VitC略低或差異不顯著(P>0.05),且自由基清除能力與其多酚含量呈正相關(guān)性(R2≥0.9222)。可見,中華補(bǔ)血

6、草根多酚作為自由基清除劑加以開發(fā)利用,潛力巨大。 中華補(bǔ)血草根多酚提取物及其級(jí)分對(duì)兩種脂質(zhì)體體系β-胡蘿卜素/亞油酸脂質(zhì)體體系和大豆卵磷脂脂質(zhì)體體系)的過(guò)氧化均有一定的抑制作用,但效果顯著低于BHT。 5.為全面了解中華補(bǔ)血草全草的抗氧化活性,開展了3個(gè)器官(根、葉、花)抗氧化活性的比較。在不同體系中,根、葉、花提取物的抗氧化活性強(qiáng)弱順序不完全一致,尤其是在清除.OH能力方面,花提取物的活性突出,但總的來(lái)說(shuō),根提取物的抗

7、氧化活性比葉、花提取物強(qiáng)。根是抗氧化物質(zhì)(多酚)積累的重要器官,不過(guò),從資源綜合利用角度看,葉、花部也不容忽視。 6.測(cè)定了中華補(bǔ)血草根、葉、花提取物,及根提取物6個(gè)級(jí)分中抗氧化作用成分(多酚、黃烷醇、黃酮)的含量,結(jié)果顯示,3種器官提取物中多酚含量豐富,以根提取物(592.90 mg·g-1)最高:此外,還含有黃烷醇、黃酮,其中根提取物中黃烷醇含量(106.45 mg·g-1)最高,而花提取物中的黃酮含量(359.66 mg·

8、g-1)最高,分別是根、葉提取物的近30倍和5倍。經(jīng)純化后,F(xiàn)racⅣ、FracⅤ、FracⅥ、FracII等4個(gè)級(jí)分中多酚有所提高,增幅在10%左右,F(xiàn)racIV的多酚和黃烷醇含量最高,分別為669.19 mg·g-1、169.12 mg·g-1;各級(jí)分中 FracII檢出大量的黃酮,高達(dá)344.03mg·g-1,占多酚的55.62%??梢?,多酚類物質(zhì)是中華補(bǔ)血草抗氧化的主要作用成分,而花提取物及Frac II中還包括黃酮的貢獻(xiàn)。

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