DNA芯片技術(shù)檢測(cè)HBV-DNA多點(diǎn)基因突變的臨床研究.pdf

1、目的；利用基因芯片技術(shù)分析乙肝病毒閱讀框架多位點(diǎn)變異及其在不同的人群中、不同的治療條件下的分布和臨床意義，為臨床的珍斷和個(gè)性化治療提供科學(xué)依據(jù)，并對(duì)病人的預(yù)后和轉(zhuǎn)歸做出判斷。 方法；采集114例慢乙肝患者血清其中輕度9例，中度51例，重度15例，肝硬化30例，重型肝炎9例，分別按性別及治療條件的不同設(shè)立為男女對(duì)照組,HbeAg陽(yáng)性和抗-Hbe陽(yáng)性對(duì)照組，應(yīng)用拉米夫定或干擾素抗病毒治療和未進(jìn)行抗病毒治療的對(duì)照組以及應(yīng)用拉米夫定治療

2、和應(yīng)用干擾素治療對(duì)照組。通過乙肝基因芯片技術(shù)檢測(cè)各型肝炎以及各對(duì)照組中乙肝病毒閱讀框架pre-1814、pre-1896、BCP1762、BCP1764、P528、P552六個(gè)位點(diǎn)的變異，并分析其在不同的人群中及不同的治療條件下分布的意義。同時(shí)隨機(jī)選用應(yīng)用芯片檢測(cè)的位點(diǎn)變異陽(yáng)性的血清做全基因序列測(cè)序以證實(shí)基因芯片方法的準(zhǔn)確性。 結(jié)果；6個(gè)位點(diǎn)的變異在不同的對(duì)照組中均有分布。其中pre-1814在慢乙肝輕度、中度、重度以及肝硬化、

3、重型肝炎中的變異率分別是0、0、0、10％、0；pre-1896的變異率分別是33.3％、41.2％、46.6％、53.3％、44.4％；BCP1762的變異率分別是33.3％、76.5％、80.0％、90.0％、100％；BCP1764的變異率分別是44.4％、70.6％、73.3％、80.0％、100％；P528的變異率分別是22.2％、17.6％、20.0％、26.7％、22.2％；P552的變異率分別是22.2％、41.2％、4

4、6.6％、36.7％、44.4％。 男女對(duì)照組中pre-1814、pre-1896、BCP1762、BCP1764、P552五個(gè)位點(diǎn)的變異頻率無差別，P528位點(diǎn)的變異在男性中高于在女性中的分布(p＜0.05)，有明顯差異；HbeAg陽(yáng)性和抗-Hbe陽(yáng)性對(duì)照組中pre-1814、BCP1762、BCP1764、P528、P552五個(gè)位點(diǎn)的變異頻率無差別，pre-1896變異在抗-Hbe陽(yáng)性的病人組中高于HbeAg陽(yáng)性的病人組(p

5、＜0.05)，有明顯差異；應(yīng)用拉米夫定或干擾素抗病毒治療和未進(jìn)行抗病毒治療的對(duì)照組中pre-1814、pre-196、BCP1762、BCP1764、P528五個(gè)位點(diǎn)的交異頻率無差別，P552變異在應(yīng)用拉米夫定或干擾素抗病毒治療組中高于未進(jìn)行抗病毒治療組(p＜0.05)，有明顯差異；應(yīng)用拉米夫定治療和應(yīng)用干擾素治療對(duì)照組中，pre-1814、pre-1896、BCP1762、BCP1764、P528五個(gè)位點(diǎn)的變異頻率無差別，P552變異

6、在應(yīng)用拉米夫定治療組中高于干擾素治療組(p＜0.05)，有明顯差異。全基因序列測(cè)定結(jié)果與基因芯片所測(cè)陽(yáng)性結(jié)果完全吻合。 結(jié)論；基因芯片是有效的的檢測(cè)HBV多點(diǎn)基因突變的方法。HBV基因多點(diǎn)突變廣泛存在。BCP1762、1764位點(diǎn)的變異與慢乙肝的重型化相關(guān)，兩個(gè)位點(diǎn)的聯(lián)合變異尤以明顯。山東地區(qū)抗-Hbe陽(yáng)性、HBV-DNA陽(yáng)性的慢乙肝病例中，以pre-1896位點(diǎn)的變異為常見。拉米夫定與HBV-P-552位點(diǎn)發(fā)生變異密切相關(guān)，但