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文檔簡介
1、本文旨在探討反相高效液相色譜法測定人血漿中的美他環(huán)素濃度的可行性,建立最優(yōu)化色譜條件,為該藥的藥代動力學研究提供一個可靠的定量分析方法。實驗采用高效液相色譜系統(tǒng),研究了流動相的不同pH值,流動相中有機相的不同比例,檢測了波長等因素對樣品分離度和靈敏度的影響。同時,研究了使用不同蛋白沉淀劑沉淀蛋白后對樣品分離度和靈敏度的影響。最后直接研究了血漿樣品中美他環(huán)素的濃度。經(jīng)過實驗分析,我們發(fā)現(xiàn)實驗篩選出的最優(yōu)化色譜條件為:VP-ODS2501型
2、色譜柱(4μm,4.6mmid×250mm,SHIMADZU);SIL-10HT自動進樣器;流動相:乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀(體積比為30:70),用磷酸調(diào)節(jié)pH=3.1;紫外檢測波長244nm;流速為1.0ml/min;進樣量20μl:柱溫:30℃,內(nèi)標為土霉素。以6%的高氯酸溶液(V/V)沉淀血漿樣品中的蛋白質(zhì)。該方法測定人血漿中美他環(huán)素的濃度,日內(nèi)CV小于3%,日間CV小于5%,線性范圍為0.134μg/ml~5.373
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