反相高效液相色譜法測(cè)定人血漿中美他環(huán)素的濃度.pdf

1、本文旨在探討反相高效液相色譜法測(cè)定人血漿中的美他環(huán)素濃度的可行性，建立最優(yōu)化色譜條件，為該藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究提供一個(gè)可靠的定量分析方法。實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜系統(tǒng)，研究了流動(dòng)相的不同pH值，流動(dòng)相中有機(jī)相的不同比例，檢測(cè)了波長(zhǎng)等因素對(duì)樣品分離度和靈敏度的影響。同時(shí)，研究了使用不同蛋白沉淀劑沉淀蛋白后對(duì)樣品分離度和靈敏度的影響。最后直接研究了血漿樣品中美他環(huán)素的濃度。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)分析，我們發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)篩選出的最優(yōu)化色譜條件為：VP-ODS2501型

2、色譜柱(4μm，4.6mmid×250mm，SHIMADZU)；SIL-10HT自動(dòng)進(jìn)樣器；流動(dòng)相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀(體積比為30：70)，用磷酸調(diào)節(jié)pH=3.1；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)244nm；流速為1.0ml/min；進(jìn)樣量20μl：柱溫：30℃，內(nèi)標(biāo)為土霉素。以6％的高氯酸溶液(V/V)沉淀血漿樣品中的蛋白質(zhì)。該方法測(cè)定人血漿中美他環(huán)素的濃度，日內(nèi)CV小于3％，日間CV小于5％，線性范圍為0.134μg/ml～5.373