不良心理應(yīng)激對人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤差異蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、背景：
　　卵巢癌（epithelial ovarian cancer EOC）是常見的女性生殖器惡性腫瘤，由于卵巢居于盆腔內(nèi)，且早期臨床癥狀無特異性，診斷非常困難，發(fā)現(xiàn)時已多有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，病死率占女性生殖器官惡性腫瘤的首位。雖然卵巢癌手術(shù)、放療和化療等治療方法的不斷改進(jìn)，但治療效果尚不理想，近三十年死亡率并沒有下降趨勢，五年生存率始終徘徊在30％-40%，嚴(yán)重威脅女性的生命健康。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)模式向生物-心理-社會模式轉(zhuǎn)換，逐漸發(fā)現(xiàn)

2、腫瘤的發(fā)生、發(fā)展受多種因素的影響。不良心理因素能促進(jìn)各種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展已經(jīng)成為定論，人們逐漸把腫瘤視為一種心身疾病，但其機(jī)制并不明了。因此，深入研究心理因素與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系及其影響機(jī)制，并利用心理治療來控制腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，或通過改變腫瘤患者的免疫狀態(tài)來阻止腫瘤生長，已越來越成為腫瘤醫(yī)學(xué)研究所關(guān)注的重點(diǎn)。
　　目的：
　　1、構(gòu)建不良心理應(yīng)激人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤動物模型。
　　2、探索不良心理應(yīng)激對荷人卵

3、巢癌裸鼠原位移植瘤差異蛋白表達(dá)的影響，探尋慢性心理應(yīng)激促進(jìn)卵巢癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制。
　　方法：
　　1、裸鼠分組及建立裸鼠慢性心理應(yīng)激模型；
　　2、建立人卵巢癌荷瘤裸鼠皮下移植瘤模型；
　　3、建立人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤模型；
　　4、原位移植瘤組織樣本蛋白提??；
　　5、Western blot檢測不良心理應(yīng)激對裸鼠原位移植瘤瘤體組織中Prdx1，SOD1，GSTO1，Nm23，CKM這5種

4、蛋白表達(dá)的影響；
　　6、免疫組化驗(yàn)證不良心理應(yīng)激對荷瘤裸鼠瘤體組織中Prdx1，SOD1，GSTO1，Nm23，CKM這5種蛋白表達(dá)的影響；
　　結(jié)果:
　　1不良心理應(yīng)激對原位移植瘤裸鼠的一般生存狀態(tài)及裸鼠體重的影響
　　實(shí)驗(yàn)開始的前3天應(yīng)激組裸鼠反應(yīng)強(qiáng)烈，焦躁不安,數(shù)日后有所適應(yīng)，與對照組相比，應(yīng)激組裸鼠整體的一般生長狀態(tài)不佳，攝食量少，活動意愿及活動范圍下降，反應(yīng)遲鈍，體重增加較對照組緩慢,但攝水量相當(dāng)，

5、試驗(yàn)過程中無裸鼠死亡。試驗(yàn)結(jié)束后,應(yīng)激組裸鼠體重明顯低于非應(yīng)激組，組間比較體重差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而在試驗(yàn)開始前，兩組裸鼠組間比較體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　2不良心理應(yīng)激對荷人卵巢癌原位移植瘤裸鼠瘤體重量的影響
　　人卵巢癌組織裸鼠原位接種術(shù)后4周左右，可于裸鼠腹部捫及質(zhì)硬的腫物樣結(jié)節(jié)，隨時間推移，腫物逐漸增大，腹圍增加，皮下脂肪減少。大體上觀，應(yīng)激組裸鼠的腹部腫物生長要比非應(yīng)激組更快。整個試

6、驗(yàn)過程均無裸鼠死亡，原位移植瘤成瘤率100%。試驗(yàn)結(jié)束后仔細(xì)剝出腫瘤稱重，應(yīng)激組裸鼠瘤重明顯高于非應(yīng)激組，組間比較瘤體重量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　3裸鼠原位移植瘤組織中5種蛋白的Western blotting結(jié)果
　　Western blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)檢測的5種蛋白中，其中Prdx1，SOD1，GSTO1，Nm23這4種蛋白的表達(dá)在應(yīng)激組裸鼠原位移植瘤組織中明顯高于對照組；而CKM蛋白的表達(dá)在

7、應(yīng)激組裸鼠原位移植瘤組織中明顯低于非應(yīng)激組，組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。
　　4人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤組織的免疫組化結(jié)果
　　應(yīng)激組和非應(yīng)激組裸鼠的原位移植瘤組織經(jīng) HE染色后經(jīng)鏡檢證實(shí)為低分化腺癌，符合卵巢癌的病理特征。兩組裸鼠的原位移植瘤組織均經(jīng)免疫組織化學(xué)染色處理后鏡檢，與非應(yīng)激相比，應(yīng)激組裸鼠原位移植瘤組織中Prdx1，SOD1，GSTO1，Nm23蛋白陽性率明顯高于對照組；而原位移植瘤組織中CK