華蟾素聯(lián)合三氧化二砷的抗腫瘤作用及其抑制腫瘤血管形成的實驗研究.pdf

1、本文研究目的：通過體內(nèi)外實驗研究華蟾素(cinobufacini)以及聯(lián)合三氧化二砷(AS203)后的抗腫瘤作用及其抑制腫瘤血管新生的作用并探討其作用機(jī)制。 研究方法：體外實驗：采用MTT法、透射電鏡觀察、免疫組化等方法，觀察華蟾素以及聯(lián)合AS203后對人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721及建株人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304生長的抑制作用，并觀察藥物對VEGF、EGFR蛋白表達(dá)的影響。應(yīng)用CAM技術(shù)，觀察了華蟾素以及聯(lián)合AS2O3后對雞

2、胚尿囊膜新生血管形成的影響。體內(nèi)試驗：建立人肝癌裸鼠抑制瘤模型，將32只裸鼠，隨機(jī)分為4組(生理鹽水組、華蟾素組、AS203組、華蟾素聯(lián)合AS203組)每組8只，于移植瘤塊后第7天開始用藥，均腹腔注射，每日一次，每次0．2ml體積，用藥連續(xù)3周。停藥后解剖裸鼠，觀察藥物對移植瘤的抑制作用，免疫組化方法觀察藥物對移植瘤VEGF、EGFR及微血管密度的影響。 研究結(jié)果：體外實驗表明，華蟾素可抑制SMMC-7721細(xì)胞及ECV-304

3、細(xì)胞的增殖，并呈量效和時效特點。華蟾素聯(lián)合AS203后對SMMC-7721細(xì)胞的抑制作用較單藥增強(qiáng)，但聯(lián)合后對ECV-304細(xì)胞未顯示增效作用。華蟾素使SMMC-7721細(xì)胞和’ECV-304細(xì)胞表達(dá)VEGF、EGFR明顯下降，聯(lián)合后此作用增強(qiáng)。雞胚尿囊膜實驗表明，華蟾素具有抑制CAM血管形成的作用，聯(lián)合AS203后此抑制作用增強(qiáng)。體內(nèi)實驗結(jié)果表明，華蟾素對裸鼠人肝癌移植瘤有一定的抑制作用，聯(lián)合AS203后抑瘤作用增強(qiáng)。免疫組化結(jié)果顯示