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1、真菌多糖是一類從真菌的子實(shí)體或菌絲體分離出來(lái)的天然高分子化合物。研究表明真菌多糖具有抗病毒、抗凝血、降血脂、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老等多種生物活性,現(xiàn)已被開發(fā)成多種藥物和功能性食品添加劑。隨著天然藥物化學(xué)、藥理研究的不斷深入,真菌多糖已引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的極大興趣,其重要生物學(xué)效應(yīng)成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)。豬肚菇多糖(ZDG)作為一種珍貴食用真菌,由于對(duì)其研究還很少,因此具有重要的開發(fā)價(jià)值。本研究選擇豬肚菇多糖,對(duì)其提取分離純化工藝進(jìn)行研究,并
2、初步探討其對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠在增強(qiáng)免疫力、抗疲勞、延長(zhǎng)耐缺氧等方面的生物活性,為豬肚菇多糖作為藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本研究實(shí)驗(yàn)內(nèi)容如下: 1、豬肚菇樣品預(yù)處理采用超聲波處理,70%乙醇浸泡的樣品超聲30mm,再靜置24h,此過(guò)程在提高多糖提取率的同時(shí),同時(shí)也去除了部分蛋白質(zhì),有益于后續(xù)樣品多糖的純化。 2、豬肚菇多糖的熱水浸提工藝優(yōu)化通過(guò)樣品預(yù)處理、單因素實(shí)驗(yàn)、四因素三水平雙目標(biāo)監(jiān)測(cè)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化。綜合多糖提取率和蛋白質(zhì)浸出率數(shù)據(jù),確
3、定最佳工藝條件為:提取溫度90℃、浸提時(shí)間4h、料液比1:30、浸提次數(shù)3次。 3、豬肚菇多糖的活性炭脫色效果對(duì)活性炭脫色效果,分別在用量、溫度、時(shí)間幾個(gè)方面進(jìn)行考查,確定1%的活性炭在30℃下,脫色60min效果最佳。 4、大孔樹脂純化豬肚菇多糖在9種大孔吸附樹脂中進(jìn)行篩選,選用AB-8型(規(guī)格30mm×300mm)大孔吸附樹脂對(duì)豬肚菇多糖進(jìn)行分離純化。純化條件為:洗脫速度:2mL/min;NaCI溶液濃度:0.2mg
4、/mL。 5、豬肚菇多糖的DEAE-纖維素分離取純化豬肚菇多糖上DEAE-纖維素柱,用不同洗脫液洗脫,蒸餾水洗脫得一種中性多糖ZDG-1,0.1和0.3mol/LNaCl溶液分別洗脫得兩種不同的酸性多糖ZDG-2、ZDG-3。 6、豬肚菇多糖的單糖組分研究采用氣相色譜法測(cè)定ZDG-2的單糖組分,結(jié)果表明主要是由D-甘露糖、D-半乳糖、葡萄糖三種單糖組分組成。 7、豬肚菇多糖的生物活性研究用豬肚菇多糖對(duì)小鼠的免疫調(diào)
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