花生四烯酸代謝通路基因多態(tài)性與腦梗死及易損斑塊的交互研究.pdf

1、[研究背景與目的]：
　　腦血管病是我國人口死亡和殘疾的最主要原因，其中腦梗死占所有腦血管病的85-90％。腦梗死是一類由多種病因和發(fā)病機(jī)制構(gòu)成的疾病，其易感性受到多種環(huán)境因素、生活方式和遺傳基因的影響，是多種基因之間相互作用及基因-環(huán)境之間協(xié)同影響的結(jié)果?；ㄉ南┧?arachidonic acid，AA)是人體內(nèi)多種重要心腦血管活性物質(zhì)的前體，其主要有三條代謝途徑:環(huán)氧化酶(cyclooxygenase，COX)、脂氧合酶(l

2、ipoxygenase，LOX)、細(xì)胞色素P450酶(cytochrome P450，CYP)代謝途徑。已知多種AA代謝產(chǎn)物與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成及腦梗死發(fā)病有關(guān)，而AA代謝產(chǎn)物又受AA代謝通路基因所調(diào)控，因此，推測(cè)AA代謝途徑基因多態(tài)可能與頸動(dòng)脈斑塊易損性及腦梗死易感性存在關(guān)聯(lián)。在本研究中納入腦梗死患者294例，健康對(duì)照者282例，采用基質(zhì)輔助激光解析/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜法(MALDI-TOF)，分析與LOX代謝通路有關(guān)的4個(gè)ALOX

3、5AP基因位點(diǎn)(SG13S32、SG13S42、SG13S89、SG13S114)及與CYP代謝通路相關(guān)的4個(gè)基因位點(diǎn)CYP3A5(A6986G)、CYP2C9*2(C430T)、CYP2C9*3(A1075C)和EPHX2(G860A)多態(tài)性，明確這些AA代謝通路相關(guān)基因多態(tài)性與腦梗死易感性及頸動(dòng)脈易損斑塊之間的相關(guān)性，并探討這些單核苷酸多態(tài)性(single nucleotidepolymorphisms，SNPs)之間是否存在交互作

4、用，這種交互作用是否增加了腦梗死的易感性。
　　[方法]：
　　連續(xù)收集2010年9月～2012年12月首次發(fā)病入住溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科的診斷符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)腦血管病學(xué)組制定標(biāo)準(zhǔn)的腦梗死患者共462例，根據(jù)排除標(biāo)準(zhǔn)篩選入組者后，納入研究對(duì)象為韓國Han等提出的改良TOAST分型方法診斷的動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死患者294例，將這些患者根據(jù)頸動(dòng)脈超聲結(jié)果分為易損斑塊組（69例）和穩(wěn)定斑塊組(225例

5、)。收集同期282例行頸動(dòng)脈B超檢查未見斑塊的健康體檢者作為對(duì)照者。記錄和評(píng)估腦梗死組和對(duì)照組的臨床一般資料，采用基質(zhì)輔助激光解析/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜法(MALDI-TOF)，對(duì)全部研究對(duì)象檢測(cè)LOX代謝通路上的ALOX5AP基因4個(gè)SNPs(SG13S32、SG13S42、SG13S89、SG13S114)以及CYP代謝通路上的4個(gè)SNPs(CYP3A5、CYP2C9*2、CYP2C9*3和EPHX2 G860A)的基因多態(tài)性，采用SP

6、SS16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各組候選SNPs進(jìn)行多態(tài)性分析，最后將候選的SNPs納入廣義多因子降維法(generalized multifactor dimensionalityreduction，GMDR)Beta V0.7軟件包分析基因一基因交互作用，并計(jì)算交互效應(yīng)的相對(duì)危險(xiǎn)度。
　　[結(jié)果]：
　　腦梗死組和對(duì)照組中候選SNPs的分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);經(jīng)多因素logistic回歸分析，EPHX2 G860A基

7、因GG型可能對(duì)腦梗死的發(fā)生起預(yù)防作用(OR=0.520，95％CI0.288～0.940，P=0.030)。對(duì)易損斑塊組和非易損斑塊組進(jìn)行Logistic分析，發(fā)現(xiàn)CYP3A5基因GG基因型對(duì)維持頸動(dòng)脈斑塊穩(wěn)定性起作用，可使腦梗死患者合并頸動(dòng)脈易損斑塊的風(fēng)險(xiǎn)降低59.5％(OR=0.405，95％CI0.178～0.920，P=0.031)。另研究發(fā)現(xiàn)本組人群CYP2C9*2基因只有CC基因型，無突變;CYP2C9*3基因以AA型為主要

8、基因型，突變率低。應(yīng)用GMDR軟件包計(jì)算得出與腦梗死發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)的是ALOX5AP SG13S114和CYP3A5G6986A兩個(gè)基因位點(diǎn)的交互作用模型，交互效應(yīng)的相對(duì)危險(xiǎn)度為1.804。
　　[結(jié)論]：
　　1.本研究顯示LOX代謝通路上4個(gè)候選SNPs與腦梗死易感性無關(guān)。
　　2.本組人群CYP2C9*2基因無突變型，CYP2C9*3基因突變率低，符合多數(shù)研究的結(jié)果。
　　3.本組人群CYP3A5*3等位

9、基因突變率達(dá)28.9％，符合文獻(xiàn)報(bào)道CYP3A5*3等位基因突變?cè)诟鞣N族人群中發(fā)生頻率最高，是CYP3A5基因最主要的多態(tài)性。
　　4.Logistic分析顯示，CYP3A5基因G6986A GG基因型使易損斑塊的風(fēng)險(xiǎn)降低59.5％，該基因突變可能增加腩梗死患者合并頸動(dòng)脈易損斑塊的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　5.Logistic分析結(jié)果顯示EPHX2基因G860A的GG基因型是腦梗死的保護(hù)因子，該基因突變可能增加腦梗死易感性，但未見其與