急性腦出血大鼠線粒體超微結構的變化與大黃的神經保護作用研究.pdf

1、凋亡是腦出血周圍組織細胞死亡的主要方式。線粒體是細胞凋亡的中心。近來研究發(fā)現ICH血腫周圍組織線粒體呼吸功能的下降和細胞色素C的釋放。線粒體超微結構的改變和上述二者密切相關。所以探討ICH動物模型血腫周圍神經元線粒體的超微結構是否發(fā)生病理變化,具有重要意義。在此基礎上,探討大黃治療急性腦出血的內在機制。
　　 目的:
　　 觀察ICH血腫周圍神經元線粒體超微結構的動態(tài)變化,探討大黃治療ICH的可能作用機制。
　　

2、 方法:
　　 成年Sprague-Dawley大鼠在尾狀核注入collagellaseⅣ(0.05U/0.5uL)誘導ICH,假手術大鼠在相同位置注入相同劑量的生理鹽水。術后3h、6h、12h、24h、48h,大鼠過度麻醉,心臟灌注取腦。采用電鏡進行隨機拍照,定性觀察血腫周圍組織中神經元線粒體超微結構的變化。原位末端法(TUNEL)標記血腫周圍的凋亡細胞。腦出血大鼠ICH后3h、6h、12h,腹腔注射大黃注射液(5ml/kg)

3、或相同劑量的生理鹽水。電鏡觀察治療組和對照組線粒體超微結構的改變,Westernblot法測定caspase-3活性,TUNEL標記凋亡細胞,阿樸嗎啡誘導的旋轉行為評價神經功能缺損。
　　 結果:
　　 一.ICH大鼠血腫周圍線粒體超微結構改變,包括線粒體腫脹、嵴擴張和基質密度改變。腦出血后線粒體超微結構的改變在3h不明顯,6h可見典型病變,12h、24h和48h均可見線粒體形態(tài)變化。二.ICH血腫周圍組織大量TUNEL

4、陽性細胞,凋亡細胞的百分率在24h達高峰(P＜0.05)。三.大鼠腦出血后3h和6h給予大黃注射液明顯減輕線粒體超微結構的病變,抑制casepsle-3的激活(P＜0.001),減少TUNEL陽性細胞數(P＜0.05),減少阿樸嗎啡誘導的旋轉次數(P＜0.05);腦出血后12h給藥無效。
　　 結論:
　　 1.腦出血早期可見線粒體超微結構的病理變化;
　　 2.血腫周圍組織細胞凋亡率在腦出血后24h達高峰;