大黃對(duì)腦出血大鼠閉鎖小帶蛋白-1作用的研究.pdf

1、目的和背景：腦出血(Intrcerebral Hemorrhage,ICH)是腦血管疾病中的危重類(lèi)型，發(fā)病率、死亡率及致殘率均較高，嚴(yán)重危及人類(lèi)生命健康，給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重的負(fù)擔(dān)。腦出血屬中醫(yī)“中風(fēng)”范疇，溢于脈外之血，不能重返故道，“離經(jīng)之血瘀于腦府”，因此血瘀是出血性中風(fēng)的主要病機(jī)之一。本研究所長(zhǎng)期應(yīng)用大黃為重要組成成分之一的腦溢安治療腦出血，療效肯定，大黃能起到活血化瘀的作用。現(xiàn)代基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)大黃具有改善血液循環(huán)和促進(jìn)溢血吸收等

2、作用。腦出血后損傷區(qū)（血腫內(nèi)部及周?chē)┠X組織缺血缺氧，血腦屏障遭到破壞，腦溢安能改善損傷區(qū)缺血缺氧程度，降低血腦屏障通透性，改善損傷區(qū)腦組織微環(huán)境，為神經(jīng)修復(fù)提供較好的條件。閉鎖小帶蛋白-1(Zonula Occludens-1,ZO-1)作為構(gòu)成血腦屏障緊密連接的主要蛋白成分之一，其表達(dá)水平的高低與血腦屏障的開(kāi)放、關(guān)閉密切相關(guān)，ZO-1的正常表達(dá)關(guān)系到細(xì)胞間緊密連接結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定和細(xì)胞功能的完整性。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外對(duì)該蛋白在腦血管病中的表達(dá)研

3、究多集中在腦缺血離體實(shí)驗(yàn)方面。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察活體腦出血大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)ZO-1蛋白的表達(dá)情況以及血腦屏障損傷修復(fù)情況，初步研究大黃對(duì)腦出血大鼠腦內(nèi)損傷區(qū)血腦屏障修復(fù)的作用機(jī)制。
　　 方法：將190只Sprague-Dawley雄性大鼠隨機(jī)分成正常組10只，假手術(shù)組、模型組和大黃組每組各60只，且每組分1天、2天、3天、5天、7天、14天共6個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)10只。立體定位向腦內(nèi)蒼白球注入Ⅶ型膠原酶復(fù)制腦出血模型。大黃組大鼠予

4、大黃灌胃，假手術(shù)組和模型組灌服等量蒸餾水。用依文思藍(lán)(Evans Blue,EB)作為示蹤劑觀察各組各時(shí)間點(diǎn)血腦屏障緊密連接的損傷程度，運(yùn)用免疫組化檢測(cè)各組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)損傷區(qū)周?chē)M織ZO-1蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1）大黃組與模型組在腦出血1天后ZO-1蛋白表達(dá)均較假手術(shù)組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 2)大黃組與模型組各時(shí)間點(diǎn)ZO-1蛋白表達(dá)量第3天最低，以后逐漸升高；模型組14天時(shí)

5、ZO-1蛋白表達(dá)量與假手術(shù)組相比差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；大黃組ZO-1蛋白表達(dá)7天達(dá)峰值，與假手術(shù)組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；大黃組與模型組1天、2天、3天時(shí)間點(diǎn)相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，5天、7天、14天時(shí)間點(diǎn)差異特別顯著(P＜0.01)。
　　 3)大黃組與模型組在腦出血1天后損傷區(qū)腦組織EB含量均較假手術(shù)組明顯升高。模型組第3天達(dá)最高，以后逐漸降低；第14天時(shí)與假手術(shù)組相比，差異無(wú)統(tǒng)