大鼠腦出血后血腫周圍組織AQP4的表達(dá)與血腦屏障超微結(jié)構(gòu)變化的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討腦出血后水通道蛋白4(AQP4)和血腦屏障超微結(jié)構(gòu)在腦水腫形成中的不同時(shí)間點(diǎn)的變化特征，討論二者在腦水腫形成中的作用機(jī)制。 方法：成熟SD大鼠，隨機(jī)分為正常對照組和出血組，出血組通過向右側(cè)的尾狀核注入自體非抗凝血制作大鼠腦出血模型，正常對照組不做任何處理，ICH組于造模后按時(shí)間6h、12h、24h、72h、7d、14d分6個(gè)亞組。采用免疫組化和圖像分析技術(shù)測定各組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)水腫區(qū)AQP4的表達(dá)水平，同時(shí)用干濕重法檢測腦

2、水腫含水量，EVANS BLUE檢測血腦屏障(BBB)通透性；并應(yīng)用光鏡、透射電鏡對相應(yīng)的部位進(jìn)行病理觀察，觀察BBB超微結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果：與正常組相比較，腦出血組在腦出血6h腦AQP4表達(dá)開始增加(P＜0.05)，12h明顯增加(P＜0.01)，72h達(dá)到最高(P＜0.01)，之后下降，7d仍高與正常(P＜0.05)，14d基本恢復(fù)。ICH組6h含水量、EB含量開始增加，有顯著差異性(P＜0.01)，72h達(dá)到最高峰(P＜0

3、.01)，之后下降,7d仍高于正常(P＜0.05)，14d基本接近正常水平。AQP4表達(dá)與腦含水量的變化規(guī)律趨于一致(r=0.900，P＜0.01)；腦EB含量與腦含水量的變化規(guī)律趨于一致(r=0.897，P＜0.01)；水通道蛋白4表達(dá)與腦EB含量也呈顯著正相關(guān)(r=0.918，P＜0.01)。血腦屏障電鏡觀察：腦出血后腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞6h吞飲小泡增多，線粒體堆積，毛細(xì)血管基底膜基本保持完整，隨后在12h～72h毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、星形

4、膠質(zhì)細(xì)胞足突內(nèi)可見線粒體逐漸腫脹、模糊，細(xì)胞充滿大量空泡；毛細(xì)血管基底膜斷裂、模糊、消失，腦組織間有滲出物和粒細(xì)胞浸潤。7d腦水腫減輕，內(nèi)皮細(xì)胞回縮，毛細(xì)血管基底膜形態(tài)開始恢復(fù)，14d可見增生的膠質(zhì)細(xì)胞和周細(xì)胞。 結(jié)論：腦出血后AQP4表達(dá)明顯增強(qiáng)，提示AQP4可能參與了出血性腦水腫的發(fā)生、發(fā)展過程，在出血性腦水腫的形成過程中起重要作用。腦出血后AQP4表達(dá)和BBB的通透性有顯著相關(guān)性，提示可能通過提高AQP4的表達(dá)水平，增加B