牛奶中氯霉素、甲砜霉素的高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)方法研究.pdf

1、目的:抗生素廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)生產(chǎn)中，對(duì)其在動(dòng)物源性食品中殘留的監(jiān)控、檢測(cè)不僅僅是保證食品安全的需要，而且也可以為動(dòng)物源性食品進(jìn)出口提供技術(shù)支持，意義重大。GB/T22338-2008中未涉及牛奶中氯霉素類化合物殘留的測(cè)定，且文獻(xiàn)資料中前處理方法均較為繁瑣，有機(jī)試劑用量大，SPE小柱成本較高。本課題探索出牛奶中CAP和TAP的快速檢測(cè)方法，同時(shí)也為下一步其他類型樣品中抗生素殘留的檢測(cè)提供技術(shù)支持。
　　方法:采用液液萃取(LLE)對(duì)

2、牛奶中TAP和CAP進(jìn)行提取，用0.45μm聚醚砜針式過濾頭對(duì)樣品進(jìn)行凈化，加快前處理速度，減少牛奶中脂肪等雜質(zhì)對(duì)分析過程的影響，提升檢測(cè)方法的靈敏度，同時(shí)用ZORBAX Eclipse PlusC18色譜柱對(duì)TAP和CAP進(jìn)行分離，單四級(jí)桿質(zhì)譜儀(Single Quad，SQ)進(jìn)行定性定量分析。通過實(shí)驗(yàn)對(duì)LLE參數(shù)、液相色譜參數(shù)和質(zhì)譜技術(shù)參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，研制牛奶中TAP和CAP殘留的液相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)方法，并對(duì)方法學(xué)的線性范圍、檢出限、

3、定量限、準(zhǔn)確度、精密度、穩(wěn)定性及實(shí)際樣品應(yīng)用等性能參數(shù)進(jìn)行測(cè)試，以判別其能否滿足方法學(xué)及實(shí)際應(yīng)用要求。
　　結(jié)果:1.00g牛奶加入5mL乙腈，超聲5min，4000r/min離心10min，取上清液4.5mL加0.5mL乙腈定容到5mL，渦旋混勻后再經(jīng)乙腈潤(rùn)洗活化至飽和的0.45μm聚醚砜過濾頭過濾，樣品中目標(biāo)物質(zhì)TAP和CAP提取及凈化效果較好;流動(dòng)相為乙酸銨-水和乙腈，流速0.300mL/min，梯度洗脫在乙酸銨-水∶乙腈=

4、40∶60時(shí)，TAP和CAP完美分離，峰形較好;負(fù)極性電噴霧進(jìn)樣，毛細(xì)管電壓4500v，干燥氣流10.0L/min，霧化器壓力35psig，干燥氣溫度350℃，單離子檢測(cè)掃描模式檢測(cè)，定量離子m/z321.0(CAP)和m/z354.0（TAP）。TAP和CAP在0.1ng/mL～100ng/mL內(nèi)，有較好的線性關(guān)系，TAP和CAP線性回歸方程分別為y=82.276x+141.31、y=299.92x+267.31，相關(guān)系數(shù)r分別為rT

5、AP=0.9996和rCAP=0.9999。由3倍信噪比得出的檢出限LODCAP=0.25μg/kg和LODTA=0.27μg/kg。用加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)對(duì)準(zhǔn)確度進(jìn)行檢查，TAP和CAP的高、低、中三個(gè)濃度平均加標(biāo)回收率范圍分別為91.3％～97.3％和89.0％～98.2％;日內(nèi)與日間精密度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.58％～1.47％、1.52％～6.17％及0.77％～4.90％、2.06％～6.90％。穩(wěn)定性試驗(yàn)表明在樣品可以在4℃下避光