高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對膠原蛋白降解物的分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、膠原蛋白是動物細胞外基質(zhì)的重要組成部分，約占哺乳動物總蛋白的1/3。大量研究表明許多疾病與膠原蛋白的類型、含量、分布、代謝及其動態(tài)變化異常有關(guān)，建立快速、準確的膠原蛋白檢測方法不僅有利于疾病的早期診斷，而且有助于認識致病機理。
　　 本論文在膠原蛋白熱變性、酶法降解的基礎(chǔ)上，利用液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)通過特征多肽研究大鼠皮膚中不同類型膠原蛋白的相對含量及其動態(tài)變化。實驗使用酶法從大鼠尾皮膚中提取了膠原蛋白粗品，柱前衍生化RP-H

2、PLC法分析結(jié)果表明粗品中甘氨酸含量約為31.5％，羥脯氨酸＞10％，脯氨酸＞14％，證明提取物中主要為膠原蛋白；利用紫外分光光度法通過測定膠原蛋白溶解度隨溫度的變化，確定了膠原蛋白在1MNaCl，pH8.0的0.05MTris-HCl緩沖液中的最適變性條件為50℃水浴中加熱3小時；在此基礎(chǔ)上對不同年齡的大鼠尾皮膚膠原蛋白粗品進行了變性，電泳分析結(jié)果熱變性的膠原可溶于水溶液且熱變性導致的隨機降解較低；實驗使用胰蛋白酶對變性膠原蛋白進行了

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