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1、研究目的:本實(shí)驗(yàn)將應(yīng)用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法探索檢測(cè)AICAR,GW1516及沙坦類(lèi)藥物的方法。并進(jìn)行藥物代謝研究,補(bǔ)充檢測(cè)方法,并最終應(yīng)用于興奮劑檢測(cè)。填補(bǔ)國(guó)內(nèi)外檢測(cè)方法的空白。AICAR屬于內(nèi)源性物質(zhì),存在于體內(nèi),并最終排放到尿中,需要檢測(cè)正常人體尿中內(nèi)源性AICAR濃度,才能確定是否為服用興奮劑。本實(shí)驗(yàn)將對(duì)中國(guó)人進(jìn)行AICAR的內(nèi)源性水平的檢測(cè),建立東方人的數(shù)據(jù)庫(kù)。
研究?jī)?nèi)容:1.應(yīng)用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)AICAR,GW15
2、16,GW0742及沙坦類(lèi)物質(zhì)的興奮劑檢測(cè)方法研究。通過(guò)對(duì)方法的前處理?xiàng)l件(酶解條件、萃取方式、萃取劑等)的優(yōu)化,色譜條件(流動(dòng)相體系、色譜柱等)和質(zhì)譜條件(子離子的選擇、碰撞能量、聚焦電壓等)的優(yōu)化,最終得到對(duì)幾類(lèi)藥物的LC-MS/MS的檢測(cè)方法。2.運(yùn)用此方法進(jìn)行陽(yáng)性尿的檢測(cè),研究藥物代謝規(guī)律,并檢測(cè)AICAR和沙坦類(lèi)物質(zhì)隨時(shí)間變化,在尿中的濃度變化規(guī)律。3.檢測(cè)沙坦類(lèi)物質(zhì)陽(yáng)性尿中存在的代謝物。4.檢測(cè)290名運(yùn)動(dòng)員內(nèi)源性AICAR
3、濃度水平。5進(jìn)行Irbesartan藥物代謝研究。
研究結(jié)果:方法驗(yàn)證中得出線性相關(guān)系數(shù)、最低檢測(cè)限和最低定量限滿(mǎn)足日常定量要求和興奮劑檢測(cè)靈敏度的要求;藥物日間精密度基本<20%,日內(nèi)精密度基本<20%,回收率在80%以上;基質(zhì)效應(yīng)在50%以上,符合一般驗(yàn)證要求。藥物代謝研究得到AICAR及沙坦類(lèi)物質(zhì)的代謝時(shí)間曲線及幾種代謝物。290名運(yùn)動(dòng)員內(nèi)源性AICAR濃度平均值為1528.05ng/ml,標(biāo)準(zhǔn)偏差為1165.04ng/
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