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1、本文針對生產(chǎn)上中華結(jié)縷草(ZoysiasinicaHance)抗寒性差、葉片易早衰、綠色期短的問題,將擬南芥中衰老特異啟動子PSAG12控制下的ipt基因(PSAG12-ipt)導(dǎo)入中華結(jié)縷草,獲得了抗寒性提高、葉片衰老延緩的轉(zhuǎn)基因株系。 本文建立了一套高效的中華結(jié)縷草再生體系;通過基因槍介導(dǎo)法將PSAG12-ipt導(dǎo)入中華結(jié)縷草胚性愈傷組織,經(jīng)抗性篩選、PCR擴(kuò)增和Southern雜交,共獲得37株轉(zhuǎn)ipt基因植株。其中有6個
2、轉(zhuǎn)基因株系衰老延緩、綠色期延長,生育后期體內(nèi)細(xì)胞分裂素、可溶性蛋白等含量明顯高于野生型,而脫落酸含量明顯下降。通過測定離體葉片培養(yǎng)過程中光合速率的變化,也證實了轉(zhuǎn)基因植株葉片衰老速度明顯減慢?! ”疚囊灾腥A結(jié)縷草種胚誘導(dǎo)出的胚性愈傷組織作為受體,以NTPII作抗性基因,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法成功地將嵌合基因PsAG12-ipt導(dǎo)入結(jié)縷草胚性愈傷組織中,在含100mg/LG418的培養(yǎng)基上經(jīng)篩選、分化、壯苗后得到35株轉(zhuǎn)化植株。經(jīng)PCR、So
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