花粉管通道法將葉片衰老延緩基因P-,SAG12--IPT導入小麥品種的研究.pdf

1、n 女目—墜塹一女＆—＆—衛(wèi)_西弛農林講捉大學2 0 0 7 屆攻讀碩士學位研究生學位( 畢業(yè)) 論文花粉管通道法將葉片衰老延緩基因P 。：一lP T 導入小麥品種的研究學科專業(yè)也塑運盞直挫堂研究方向 盛些生塑堇苤研究生廷 照指導教師 型匿丕煎攫完成時同 2 Q Q ! 生§且中國陜西楊凌占卡那霉素抗性株的1 6 ．6 ％，說明卡那霉素的初步篩選是有效的，其適宜濃度和時期為二葉一心一三葉- - , t ) + 2 0 0 0

2、0 m g ／L 卡那霉素。4 ．通過比較不同的D N A 溶劑對花粉管轉化小麥結實性的影響，結果表明表面活性劑顯著降低小麥結實率和種子發(fā)芽率，抑制種子發(fā)育，不宜作為轉化的外源D N A 溶劑。5 ．通過比較不同柱頭外露時間對對花粉管轉化小麥結實性的影響，結果表明柱頭活力對花粉管轉化小麥結實率影響顯著，柱頭外露時間超過8 d 的結實率顯著低于8 d 前的結實率，所以柱頭外露時間不宜超過8 d 。6 ．通過比較不同的D N A 濃度和轉化

3、時間對花粉管轉化小麥結實性的影響，結果表明轉化時間對結實率影響顯著，轉化時間為3 0 分鐘的結實率顯著低于6 0 分鐘和9 0 分鐘的結實率，所以轉化時間不應低于6 0 分鐘：D N A 濃度對結實率影響可能存在品種間差異。D N A 濃度對豫麥1 8 結實率影響不顯著，而對鄭麥9 0 2 3 結實率影響顯著，濃度為7 0 0 n g ／u l結實率顯著高于3 0 0 n g ／u l 、5 0 0n g ／u l ，與對照0 n g

4、／u l 差異不顯著。7 ．利用花粉管通道法首次將葉片衰老延緩基因P s A O l 2 - - I P T 導入小麥品種鄭麥9 0 2 3和豫麥1 8 ，其中鄭麥9 0 2 3 一株，豫麥1 8 三株，總轉化效率為0 ．5 ‰，所有陽性植株都是來自人工授粉方式，轉化時間為6 0 分鐘，D N A 濃度為5 0 0 ．7 0 0 n g ／L ，以T E 或水作為D N A 溶劑的處理組合。關鍵詞：小麥；卡那霉素；花粉管通道法；遺傳轉化