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1、目的:通過觀察不同濃度的卡介菌多糖核酸(BCG)、胸腺肽對(duì)人 A375黑素瘤細(xì)胞的生長、酪氨酸酶活性及黑素生成的影響,探討免疫調(diào)節(jié)劑對(duì)治療白癜風(fēng)的可能作用機(jī)制。
方法:人A375黑素瘤細(xì)胞用不同濃度的BCG、胸腺肽處理,用多巴氧化法測(cè)定酪氨酸酶活性的變化,通過MTT法觀察它們對(duì)人A375黑色瘤細(xì)胞生長的影響,用NaOH裂解法測(cè)定黑素的含量。
結(jié)果:1.兩種藥物對(duì)人A375黑素瘤細(xì)胞代謝的影響:與對(duì)照組相比:BCG的濃
2、度為0.1ug/ml、0.5ug/ml、1ug/ml、2.5ug/ml、5ug/ml、10ug/ml時(shí)隨著藥物濃度的增加,細(xì)胞數(shù)目呈增加趨勢(shì)(p<0.05),細(xì)胞生長旺盛。BCG的處理時(shí)間24h、48h及72h比較,48h處理時(shí)達(dá)到最佳促進(jìn)細(xì)胞生長效果。而濃度為50ug/ml—300ug/ml胸腺肽處理人A375黑素瘤細(xì)胞24h時(shí),對(duì)細(xì)胞的代謝卻沒有影響(p>0.05),當(dāng)處理時(shí)間達(dá)到48h時(shí),各個(gè)濃度處理組均表現(xiàn)出對(duì)人A375細(xì)胞的增
3、殖促進(jìn)作用,且該促進(jìn)作用呈劑量依賴性。而當(dāng)處理時(shí)間延長至72小時(shí)時(shí),這種促進(jìn)作用的效果有所降低。
2.兩種藥物對(duì)人A375黑素瘤細(xì)胞酪氨酸酶活性影響:兩種藥物均顯示上調(diào)細(xì)胞的酪氨酸酶活性。其中BCG在48小時(shí)10ug/ml濃度時(shí)上調(diào)酪氨酸酶的活性最為明顯(p<0.05),而胸腺肽在72小時(shí)300ug/ml濃度時(shí)顯示處最佳上調(diào)酪氨酸酶活性效果(p<0.05),其中胸腺肽使酪氨酸酶的活性增加的效果優(yōu)于BCG。
3.兩種藥
4、物對(duì)人A375黑素瘤細(xì)胞黑素含量的影響:兩種藥物均顯示上調(diào)細(xì)胞的黑素含量。其中BCG處理后黑素瘤細(xì)胞中黑素含量升高不明顯(P>0.05)。而胸腺肽促進(jìn)細(xì)胞黑素含量的效果比較明顯,且呈時(shí)間劑量依賴性關(guān)系,其中以300μg/ml處理72h作用最為明顯黑素含量增加(P<0.05)。
結(jié)論:一定濃度的BCG和胸腺肽均可以促進(jìn)人A375黑素細(xì)胞增殖,上調(diào)細(xì)胞酪氨酸酶活性,從而達(dá)到促進(jìn)黑素合成的效果,且他們的促進(jìn)效果都與處理的時(shí)間及劑量相
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