細胞抑癌因子ARF與腺病毒E1A蛋白關系的研究.pdf

1、ARF是哺乳動物細胞內(nèi)的一個重要抑癌因子(小鼠細胞中是Pl9ARF，人類細胞中是Pl4ARF)。一般生理條件下，ARF表達量保持著較低水平，但是當細胞受到一些致癌因素的刺激時，它會響應信號而表達量上升。ARF一般通過p53-依賴或p53-非依賴的途徑實施其抑癌功效。ElA基因是腺病毒致病的關鍵基因，它主要是通過結(jié)合細胞內(nèi)Rb蛋白和P300/CBP，然后啟動自身病毒基因的轉(zhuǎn)錄及引發(fā)宿主細胞周期失控，最終可導致相關細胞的癌化。
　　

2、 在本課題研究中，通過外源性的和內(nèi)源性的免疫共沉淀首次發(fā)現(xiàn)了ARF與腺病毒ElA蛋白之間的相互作用，兩者之間的結(jié)合并不依賴于p53的存在。在功能方面，發(fā)現(xiàn)Pl4ARF可以抑制ElA對于病毒基因組的轉(zhuǎn)錄激活與引起的細胞DNA復制。在探索其內(nèi)在機制時，發(fā)現(xiàn)高表達Pl4ARF可以改變ElA原先的細胞核漿定位，ElA進入細胞核仁后加速了其被泛素化途徑降解。而通過Knockdown方法下調(diào)內(nèi)源性pl4ARF，我們發(fā)現(xiàn)ElA的轉(zhuǎn)錄激活能力顯著升高。