E1A通過E6-E6AP增強宮頸癌放療敏感性的機制研究.pdf

1、中圖分類號屋!壘Z鄉(xiāng)UDC3tD碩士學位論文學校代碼!Q量三三密級公玨E1A通過E6／E6AP增強宮頸癌放療敏感性的機制研究MolecularmechanismofE1AmediatedradiosensitivitybyinterferingwithE6／E6APinteraction作者姓名：學科專業(yè)：研究方向：學院(系、所)：指導(dǎo)教師：論文答辯日期2翌!芏!蘭!蘭7王穎臨床醫(yī)學腫瘤學湘雅醫(yī)院申良方教授答辯委員會主席二緝中南大學二零

2、一四年五月E1A通過E6／E6AP增強宮頸癌放療敏感性的機制研究摘要目的：探討腺病毒E1A基因?qū)m頸癌放療敏感性的影響及相關(guān)的分子生物學機制。方法：將pcDNA31()E1A質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入人宮頸癌細胞中，觀察各細胞中E1A的表達，采用WesternBlot方法檢測E1A基因?qū)53蛋白表達水平的調(diào)控及下游生物學行為的相關(guān)變化，流式細胞術(shù)檢測E1A對高危型HPV陽性宮頸癌細胞放療后凋亡的影響；免疫共沉淀揭示E1A轉(zhuǎn)染入細胞后與E6AP的相互作

3、用，并通過構(gòu)建體外泛素化系統(tǒng)，探討E1A、E6、E6AP對P53泛素化水平的影響。結(jié)果：宮頸癌細胞內(nèi)無內(nèi)源性的E1A表達，通過基因轉(zhuǎn)染技術(shù)，E1A能穩(wěn)定地在人宮頸癌細胞中表達。WesternBlot顯示E1A能明顯增加HPV陽性宮頸癌細胞內(nèi)p53的表達，唧V陰性的宮頸癌細胞未見到這一生物學效應(yīng)。流式細胞術(shù)顯示E1A能顯著增加宮頸癌細胞對放療誘導(dǎo)的凋亡率，該效應(yīng)與P53的表達升高導(dǎo)致的宮頸癌細胞凋亡密切相關(guān)。免疫共沉淀明確E1A能與E6A