E1A通過E6-E6AP增強(qiáng)宮頸癌放療敏感性的機(jī)制研究.pdf_第1頁(yè)
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1、中圖分類號(hào)屋!壘Z鄉(xiāng)UDC3tD碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q量三三密級(jí)公玨E1A通過E6/E6AP增強(qiáng)宮頸癌放療敏感性的機(jī)制研究MolecularmechanismofE1AmediatedradiosensitivitybyinterferingwithE6/E6APinteraction作者姓名:學(xué)科專業(yè):研究方向:學(xué)院(系、所):指導(dǎo)教師:論文答辯日期2翌!芏!蘭!蘭7王穎臨床醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)湘雅醫(yī)院申良方教授答辯委員會(huì)主席二緝中南大學(xué)二零

2、一四年五月E1A通過E6/E6AP增強(qiáng)宮頸癌放療敏感性的機(jī)制研究摘要目的:探討腺病毒E1A基因?qū)m頸癌放療敏感性的影響及相關(guān)的分子生物學(xué)機(jī)制。方法:將pcDNA31()E1A質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入人宮頸癌細(xì)胞中,觀察各細(xì)胞中E1A的表達(dá),采用WesternBlot方法檢測(cè)E1A基因?qū)53蛋白表達(dá)水平的調(diào)控及下游生物學(xué)行為的相關(guān)變化,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)E1A對(duì)高危型HPV陽(yáng)性宮頸癌細(xì)胞放療后凋亡的影響;免疫共沉淀揭示E1A轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后與E6AP的相互作

3、用,并通過構(gòu)建體外泛素化系統(tǒng),探討E1A、E6、E6AP對(duì)P53泛素化水平的影響。結(jié)果:宮頸癌細(xì)胞內(nèi)無內(nèi)源性的E1A表達(dá),通過基因轉(zhuǎn)染技術(shù),E1A能穩(wěn)定地在人宮頸癌細(xì)胞中表達(dá)。WesternBlot顯示E1A能明顯增加HPV陽(yáng)性宮頸癌細(xì)胞內(nèi)p53的表達(dá),唧V陰性的宮頸癌細(xì)胞未見到這一生物學(xué)效應(yīng)。流式細(xì)胞術(shù)顯示E1A能顯著增加宮頸癌細(xì)胞對(duì)放療誘導(dǎo)的凋亡率,該效應(yīng)與P53的表達(dá)升高導(dǎo)致的宮頸癌細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。免疫共沉淀明確E1A能與E6A

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