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文檔簡介
1、將疑似傳染性胃腸炎病豬的糞便病料進(jìn)行處理后，接種于豬睪丸傳代細(xì)胞(ST)中觀察，得到穩(wěn)定的細(xì)胞病變。通過核酸類型實(shí)驗(yàn)、脂溶劑敏感性實(shí)驗(yàn)，顯示該病毒為有囊膜的RNA病毒；使用電子顯微鏡觀察病毒形態(tài)，可以看到直徑大小約90nm的病毒粒子；通過中和實(shí)驗(yàn)，將病毒細(xì)胞接種液和豬傳染性胃腸炎病毒兔高免血清發(fā)生中和反應(yīng)，得到了較高的中和滴度。結(jié)果表明成功地分離并鑒定了一株傳染性胃腸炎病毒，并命名為TGEVSC-A?！ 「鶕?jù)GenBank報(bào)道的豬傳染
2、性胃腸炎序列，設(shè)計(jì)包含TGEV的S基因1760bp的部分片段的一對(duì)引物。通過RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增，得到了一條約1.8kb序列，通過低熔點(diǎn)瓊脂糖純化回收該片段后，將此片段連接在pDM18-T載體上，轉(zhuǎn)化DH5a大腸桿菌，使用雙酶切和PCR法對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行鑒定后，將重組質(zhì)粒送大連寶生物公司測(cè)序?！ ⊥ㄟ^DNAstar軟件的同源性搜索和多重序列比較分析，結(jié)果顯示四川株TGEV與國外報(bào)道的部分TGEV病毒分離株具有較高的同源性，并且其保守序列
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