豬冠狀病毒性腹瀉RT-PCR檢測(cè)及豬傳染性胃腸炎病毒分離鑒定.pdf

1、豬冠狀病毒性腹瀉是由豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)和豬流行性腹瀉病毒(PEDV)是一種有極高死亡率的惡疾，初期癥狀為上吐下瀉。這兩種惡疾的致病因素同屬冠狀病毒，所致疾病臨床表現(xiàn)十分相似，并多以混合感染。此類(lèi)疾病是我國(guó)及世界各養(yǎng)豬國(guó)家仔豬早期死亡的重要病因之一。準(zhǔn)確了解兩種疾病在我國(guó)不同地區(qū)發(fā)病和死亡情況對(duì)科學(xué)防治本病具有重要意義。
　　本實(shí)驗(yàn)在2012年2月至2015年8月收集了內(nèi)蒙古西部和東部地區(qū)的26個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)發(fā)病豬的腹瀉糞

2、便，對(duì)這些病料樣品進(jìn)行了PEDV和TGEV的RT-PCR擴(kuò)增，以此了解當(dāng)?shù)馗篂a發(fā)生的準(zhǔn)確病因，另一方面，利用TGEV RT-PCR擴(kuò)增陽(yáng)性的糞便樣品，在ST細(xì)胞上進(jìn)行了病毒的分離培養(yǎng)。
　　通過(guò)對(duì)26個(gè)規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)TGEV和PEDV兩種病毒的檢測(cè)表明，有22個(gè)發(fā)病豬場(chǎng)檢測(cè)到了PEDV，有4個(gè)豬場(chǎng)檢測(cè)到TGEV，當(dāng)中有3個(gè)豬場(chǎng)是與PEDV混合感染，只有1個(gè)豬場(chǎng)為T(mén)GEV單獨(dú)感染，其中2個(gè)豬場(chǎng)TGEV和PEDV均未檢出。調(diào)查結(jié)果顯示，

3、在內(nèi)蒙古地區(qū)發(fā)生豬病毒性腸炎的治病因素主要是因?yàn)椴《拘缘闹尾∫蜃訉?dǎo)致的
　　通過(guò)對(duì)豬病毒性腹瀉治病因子的分離培養(yǎng)顯示，病毒在ST細(xì)胞上培養(yǎng)的前20代很難觀(guān)察到細(xì)胞病變，隨著傳代次數(shù)的增加，病變逐漸明顯，30代以后，細(xì)胞表現(xiàn)為圓縮，脫落逐漸明顯。RT-PCT檢測(cè)表明，所有代次的病毒均檢測(cè)到TGEV，說(shuō)明病毒在細(xì)胞上能夠穩(wěn)定的增殖和傳代下去;通過(guò)間接免疫熒光、病毒電鏡的形態(tài)觀(guān)察充分證明，所分離的病毒是豬傳染性胃腸炎病毒。本病毒的分離培