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文檔簡介
1、研究背景:
裸鼠作為一種特殊的模式動物廣泛應(yīng)用于諸如免疫、腫瘤、移植等研究領(lǐng)域。裸鼠胸腺免疫缺陷,體表無茸密鼠毛,類似正常成人體表皮膚外觀,是異種異體皮膚移植的理想受體。但是與人類皮膚相比,裸鼠皮膚又有其自身的組織學(xué)特點(diǎn)。因此,對裸鼠皮膚的組織學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入觀察研究,并將其與成人體表皮膚的組織學(xué)作一比較顯得必要,為相關(guān)研究受試前后的研究結(jié)果提供可靠的參照,并促使研究成果更好的向臨床轉(zhuǎn)化。
然而,目前缺少選取裸鼠皮膚為
2、比較對象的組織學(xué)報道;前人以皮膚為對象的比較組織學(xué)研究多側(cè)重不同綱、目間的橫向比較,其中涉及鼠與人皮膚的形態(tài)學(xué)差異描述較為籠統(tǒng),并未見細(xì)致的報道;且這些研究多從純生物學(xué)角度進(jìn)行比較,忽略了比較組織學(xué)在轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)方面的價值。
本研究選取正常成年裸鼠皮膚與正常成人體表皮膚作一組織學(xué)比較,為皮膚病學(xué)和腫瘤學(xué)領(lǐng)域的研究提供客觀有效的組織學(xué)依據(jù)。
研究目的:
本實(shí)驗(yàn)取健康成年裸鼠(8w,BALB/c-nu,雌雄不限)及
3、成人正常皮膚,對二者進(jìn)行蘇木精-伊紅染色、Masson-Fontana染色以及透射電子顯微鏡檢查,觀察裸鼠皮膚和成人皮膚全層組織學(xué)結(jié)構(gòu)、黑色素的分布及表皮基底層黑色素細(xì)胞的情況,對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析評價,探討比較成年裸鼠皮膚和成人體表皮膚組織學(xué)結(jié)構(gòu),為相關(guān)領(lǐng)域的研究結(jié)果提供可靠的參照,促使其向臨床轉(zhuǎn)化。
研究方法:
1、蘇木精-伊紅染色取裸鼠背部及成人胸部全層皮膚,用10%福爾馬林溶液固定24小時,經(jīng)脫水、透明、石蠟包
4、埋后制成4μm石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水后行
蘇木素-伊紅染色,光鏡下觀察全層皮膚的一般結(jié)構(gòu)。
2、Masson-Fontana染色取裸鼠背部及成人胸部全層皮膚,用10%福爾馬林溶液固定24小時,經(jīng)脫水、透明、石蠟包埋后制成4μm石蠟切片,脫蠟至水后行Masson-Fontana染色,光鏡下觀察黑色素分布情況。
3、透射電子顯微鏡檢查取裸鼠新鮮皮膚置于2.5%戊二醛溶液固定12小時。常規(guī)用丙酮/環(huán)氧樹脂包埋制成
5、500?的切片,醋酸鈾和檸檬酸鉛染色,透射電子顯微鏡觀察黑色素細(xì)胞。
結(jié)果:
HE染色可見成人全層皮膚明顯厚于裸鼠;裸鼠的表皮與真皮接壤處平坦,而成人的表皮與真皮接壤處形成表皮嵴及真皮乳頭;裸鼠表皮顆粒層不清晰,成人表皮顆粒層多由一層顆粒細(xì)胞構(gòu)成;成人表皮基底層可見個別細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含淺棕色顆粒,而裸鼠未見。成人具有完整汗腺結(jié)構(gòu),裸鼠汗腺缺如。成人皮脂腺明顯比裸鼠發(fā)達(dá),腺細(xì)胞較成熟;裸鼠皮脂腺不發(fā)達(dá),腺細(xì)胞可見雙核。成人
6、毛囊一側(cè)可見明顯立毛肌,裸鼠未見明顯立毛肌結(jié)構(gòu)。裸鼠皮下組織中可見一層橫紋肌,這在人皮下組織中未見。Masson-Fontana染色顯示人皮膚基底層棕黑色顆粒帶,為陽性結(jié)果;而裸鼠皮膚為陰性結(jié)果。透射電鏡觀察裸鼠皮膚基底層可見黑色素細(xì)胞及黑素小體,其形態(tài)特點(diǎn)與電鏡下人皮膚基底層黑色素細(xì)胞及黑素小體相一致。
結(jié)論:
裸鼠皮膚和成人皮膚光鏡組織學(xué)結(jié)構(gòu)存在差異:裸鼠皮膚薄于成人,幾乎不形成表皮嵴和真皮乳頭;成人皮脂腺較裸鼠
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