非小細(xì)胞肺癌MK、DPC4-Smad4的表達(dá)及其相關(guān)性的研究.pdf

1、目的：肺癌是最常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率是惡性腫瘤中連續(xù)60年來(lái)唯一逐年明顯上升的腫瘤。了解肺癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制將有利于肺癌的診治及預(yù)防。當(dāng)人體的癌基因和抑癌基因平衡被打破，從而引起細(xì)胞增殖失控，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。
　　 許多研究表明生長(zhǎng)因子不僅促進(jìn)組織細(xì)胞的增殖，而且能誘導(dǎo)組織細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。中期因子(Midkine，MDK，MK)是一類肝素結(jié)合性生長(zhǎng)因子，已有研究證實(shí)，在多種腫瘤組織中MK高表達(dá)，包括食管癌、胃癌

2、、結(jié)直腸癌和胰腺癌等。MK具有多種生物學(xué)功能，它不僅在神經(jīng)發(fā)育過(guò)程中起到營(yíng)養(yǎng)及保護(hù)作用，還通過(guò)促有絲分裂和細(xì)胞增殖、促血管生成、誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化、抗凋亡等功能影響腫瘤細(xì)胞的增殖、分化及凋亡。
　　 細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)著多細(xì)胞生物的生長(zhǎng)、發(fā)育、分裂及死亡等生物學(xué)行為，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，腫瘤抑制基因DPC4/Smad4編碼的蛋白是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforminggrowthfactor-B，TGF-β)超家族細(xì)胞內(nèi)

3、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和調(diào)節(jié)的中心分子。有研究表明，Smad4的失活與表達(dá)缺失和多種腫瘤的發(fā)展、組織細(xì)胞分級(jí)以及預(yù)后有一定的關(guān)系。
　　 目前對(duì)于MK和DPC4/Smad4的研究并不少見，但是對(duì)于肺癌組織中MK和DPC4/Smad4的表達(dá)與相關(guān)性的研究，以及二者在肺癌分期、病例分型的關(guān)系方面的研究尚處于相對(duì)空白狀態(tài)。本研究旨在通過(guò)運(yùn)用免疫組化的方法檢測(cè)MK和DPC4/Smad4在肺癌及癌旁組織中的表達(dá)，探討其在肺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。進(jìn)一步揭

4、示二者在肺癌發(fā)生過(guò)程中是否存在相關(guān)性。為基因水平的肺癌檢測(cè)及治療提供理論基礎(chǔ)和依據(jù)。
　　 方法：收集經(jīng)手術(shù)切除且病理證實(shí)的非小細(xì)胞肺癌病例52例，所有患者術(shù)前未經(jīng)過(guò)化療及放療，分別記錄患者的性別、年齡、腫瘤大小、組織學(xué)類型、病理分期等臨床資料，采用免疫組化S-P法檢測(cè)標(biāo)本中MK和DPC4/Smad4表達(dá)。選取無(wú)壞死的癌旁組織30例，作為陰性對(duì)照，所選取的組織距病灶切除的距離5cm以上。陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：每張切片選取具有代表性的5個(gè)

5、高倍視野進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，以出現(xiàn)棕色顆粒作為陽(yáng)性細(xì)胞，采用半定量積分法，分別根據(jù)染色程度和染色細(xì)胞的百分率進(jìn)行分級(jí)評(píng)分，并將評(píng)分的乘積作為判定標(biāo)準(zhǔn)，以判定其陽(yáng)性程度。根據(jù)染色程度：基本不染色為0分，著色淡為1分，著色適中為2分，著色深為3分；著色細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞的百分率：≤5％為0分，＞5％～25％為1分，＞25％～50％為2分，＞50％為3分。將每張切片的平均著色程度得分與平均細(xì)胞著色百分率得分各自相乘為最后得分：

6、≤1分為陰性（一），2～3分為陽(yáng)性(+)，≥4分為強(qiáng)陽(yáng)性(++)。應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS17.0，通過(guò)X2檢驗(yàn)及Spearman相關(guān)性分析法分析二者與非小細(xì)胞肺癌的關(guān)系及二者之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果：
　　 1.52例非小細(xì)胞肺癌標(biāo)本中，MK和DPC4/Smad4陽(yáng)性表達(dá)率分別為59.62％(31/52)、63.46％(33/52)，30例癌旁正常肺組織的MK和DPC4/Smad4陽(yáng)性表達(dá)率分別為16.67％(5/30)

7、，90.00％(27/30)，兩組比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 2.MK和DPC4/Smad4陽(yáng)性表達(dá)與性別、年齡及腫瘤大小均無(wú)關(guān)系，差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。
　　 3.MK和DPC4/Smad4陽(yáng)性表達(dá)與肺癌分化程度無(wú)關(guān)系，組間差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。
　　 4MK和DPC4/Smad4陽(yáng)性表達(dá)與肺癌臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)，有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：<