2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、  目的:克隆,構(gòu)建,鑒定人組織激肽釋放酶基因真核表達(dá)載體:探討其對(duì)腎性高血壓大鼠的降壓效應(yīng)和機(jī)制。
  方法:以pBluescripe Ⅱ KSKLK(+)質(zhì)粒為模板,通過PCR的方法擴(kuò)增出人組織激肽釋放酶基因(KLK)。將其克隆到真核表達(dá)載體pcDNA3的多克隆位點(diǎn),構(gòu)建成pcDNA3-KLK,進(jìn)行酶切及測(cè)序鑒定。將pcDNA3-KLK質(zhì)粒注入“兩腎一夾”腎性高血壓大鼠的股四頭肌內(nèi),隨后給予80V、1Hz、40ms電刺激6次,

2、用RT-PCR和Western印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人KLK基因在大鼠骨骼肌內(nèi)的表達(dá)。每周測(cè)量大鼠收縮壓兩次。
  結(jié)果:成功構(gòu)建了人重組KLK真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-KLK,經(jīng)測(cè)序鑒定,表明:本研究克隆的人組織激肽釋放酶基因與Genbank報(bào)告的人KLK基因序列一致,同源性為100%。
  人KLK基因可以在骨骼肌中表達(dá),并可釋放入血,明顯降低腎性高血壓大鼠的血壓,降幅達(dá)8-21mmHg,其作用至少可維持4周,較對(duì)照組有顯著性差異

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