大劑量甲基強(qiáng)的松龍聯(lián)合膠質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)生長(zhǎng)因子治療急性脊髓損傷對(duì)細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：觀察早期大劑量甲基強(qiáng)的松龍（MP）和膠質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)生長(zhǎng)因子（GDNF）聯(lián)合對(duì)大鼠急性脊髓損傷（SCI）后的治療作用，通過對(duì)損傷區(qū)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞內(nèi)活性氧水平測(cè)定比較，探討治療脊髓損傷的機(jī)理及有效治療方案。 方法：將大鼠按照改良Allen's法建立脊髓急性損傷模型，分為單純脊髓損傷組（A組），大劑量甲基強(qiáng)的松龍治療組（B組），膠質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)生長(zhǎng)因子組（C組），甲基強(qiáng)的松龍（MP）和膠質(zhì)細(xì)胞源神經(jīng)生長(zhǎng)因子（GDNF）組（D組），

2、損傷經(jīng)治療后1、4、7、14、21天處死每組中相應(yīng)批次動(dòng)物，心臟灌注后及固定后，取出損傷節(jié)段區(qū)脊髓組織，酒精梯度脫水后行石蠟包埋切片，切片采用TUNEL試劑盒進(jìn)行細(xì)胞凋亡的檢測(cè)（免疫組化法）以及用2’，7’—二氯熒光素二脂（DCFH—DA）探針行活性氧表達(dá)的測(cè)定（流式細(xì)胞儀），采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS11．5對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)分析。 結(jié)果：①凋亡指數(shù)（凋亡指數(shù)（AI）=凋亡細(xì)胞核數(shù)／總細(xì)胞核數(shù)）在脊髓損傷后開始增高，至傷后第7天

3、達(dá)最高，A組：43．89%，B組：32．65%，C組：34．16%，D組：30．00%（A>C>B>D，P<0．0001），至傷后14天仍維持在較高水平，14天之后便開始下降，至第21天仍維持在較高水平，A組：14．45%，B組：12．39%，C組：13．98%，D組：8．7%（A>C>B>D，P<0．0001），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能評(píng)分：采用斜板實(shí)驗(yàn)，對(duì)脊髓損傷后的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能評(píng)估，A組在受傷后運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能恢復(fù)較差，第7天

4、時(shí)評(píng)分為：2．25，21天時(shí)為：4．75，D組則恢復(fù)較好，第7天時(shí)為：5．50，21天時(shí)為：6．51，B、C組介于A、D組之間， 結(jié)論：A