甲基強的松龍促進寡突膠質前體細胞遷移的研究.pdf

1、跳躍性神經沖動的傳導依賴于髓鞘結構的形成。髓鞘結構是由分化成熟后的寡突膠質細胞特化出片層結構致密包繞軸突形成的。它對于軸突還具有保護，營養(yǎng)等功能。髓鞘結構是神經系統(tǒng)正常行使功能所必需的成分。
　　 寡突膠質細胞是由寡突膠質前體細胞(oligodendrocyte precursor cells，OPC)發(fā)育而來的。OPC在發(fā)育期經過增殖，遷移，分化等發(fā)育階段，最后包繞軸突并形成髓鞘。OPC起源于神經系統(tǒng)非常局限的區(qū)域。最早一批O

2、PC在大腦中發(fā)源于腦室下區(qū)(subventricularzone，SVZ)，在脊髓中發(fā)源于運動神經元前體區(qū)。之后在很短的時間內進行長距離遷移，并散布到整個發(fā)育過程中的中樞神經系統(tǒng)(central nervoussystem，CNS)。無論在體內還是外培養(yǎng)的條件下，OPC都有很強的運動能力。目前已鑒定出多種影響OPC的遷移因子，但是OPC遷移的具體路徑和分子機制還有很多未知之處。人類存在很多疾病與髓鞘相關。包括脊髓損傷(spinal co

3、rd injury,SCI)，脫髓鞘病(demyelination disease)，阿爾茲海默氏病等。這些疾病的共同特征是髓鞘丟失。治療此類疾病不僅要減少繼續(xù)損傷，而且要修復已有的損傷。研究發(fā)現，病人體內存在自發(fā)性髓鞘修復的現象，即再髓鞘化過程。前人已證實，成年人的中樞神經系統(tǒng)內仍然存在一定比例的OPC，病理損傷時OPC會被激活，不斷從SVZ準確遷移到損傷部位。再髓鞘化過程相當于重現OPC發(fā)育過程中的各個階段，即遷移，分化和成髓鞘。遷

4、移過程是OPC修復受損髓鞘最先需要完成的步驟。促進OPC的遷移的無疑有助于加速再髓鞘化過程。因此無論從生理發(fā)育的角度還是從病理的角度，研究OPC的遷移過程具有重要的意義。
　　 甲基強的松龍(methylprednisolone，Mep)是臨床治療脊髓損傷和多發(fā)性硬化(multiple sclerosis，MS)的常用藥。Mep是一種人工合成的糖皮質激素的類似物，它作為一種免疫系統(tǒng)的調質，抑制免疫系統(tǒng)的活化和炎癥反應，從而減少免

5、疫系統(tǒng)對神經系統(tǒng)的攻擊和髓鞘的丟失。給予Mep后癥狀得到緩解是否僅僅由于Mep的免疫抑制作用，Mep對于OPC本身有何種作用，尤其是對于OPC的遷移是否有影響是非常有意義的問題。
　　 本課題的研究證實了Mep以糖皮質激素受體(glucocorticoid receptor,GR)依賴和激活ERK1/2磷酸化的方式促進OPC細胞的遷移。
　　 本研究的主要結果如下：
　　 1.體外純化培養(yǎng)OPC。培養(yǎng)的細胞顯示所

6、純化出的細胞與文獻報道一致，典型OPC呈雙極狀態(tài)，表達OPC的分子標記NG2，A285，并可分化為O4陽性，O1陽性或MBP陽性等不同階段的寡突膠質譜系細胞。
　　 2.Mep促進OPC的遷移。利用Transwell檢測發(fā)現100nM、1μM的Mep對OPC的遷移有顯著促進作用。Matri膠遷移實驗模型證實，1μM濃度的Mep處理細胞球后，遷出的細胞數量顯著增多。
　　 3.Mep對OPC的增殖沒有影響。BrdU摻入實驗

7、顯示，摻入BrdU4小時的OPC的BrdU陽性率在30％左右，不隨Mep的加入而改變。
　　 4.OPC表達糖皮質激素受體。用RT-PCR，Western-blot和免疫細胞化學染色均可以檢測到糖皮質激素受體的表達。
　　 5.Mep促進OPC遷移的作用是糖皮質激素受體依賴的。Transwell遷移模型中，GR拮抗劑Ru38486可以阻斷Mep對OPC的促遷移作用。GR的內源性配體皮質酮，具有與Mep同樣的促進OPC遷移