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1、目的:骨關(guān)節(jié)炎是目前臨床上最為常見(jiàn)的骨關(guān)節(jié)疾病,它的病因、病理機(jī)制還沒(méi)有被很好地全面地闡釋,治療上也沒(méi)有好的方法。對(duì)于骨關(guān)節(jié)炎病因的探索是目前的熱點(diǎn)和焦點(diǎn),而且爭(zhēng)論很大。Ⅱ型膠原是關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)的主要結(jié)構(gòu)成分,軟骨基質(zhì)中II型膠原質(zhì)和量的改變是導(dǎo)致骨關(guān)節(jié)軟骨喪失其正常生物力學(xué)特性的直接原因。間質(zhì)金屬蛋白酶在軟骨基質(zhì)(特別是Ⅱ型膠原)的裂解過(guò)程中起主要作用,這已被大家所公認(rèn),但對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞中Ⅱ型膠原mRNA的表達(dá)是否有改變,及其變化是
2、否直接導(dǎo)致軟骨基質(zhì)中II型膠原質(zhì)和量的改變,目前還沒(méi)有定論,且相關(guān)研究都建立在動(dòng)物模型試驗(yàn)上。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)骨關(guān)節(jié)炎患者軟骨細(xì)胞II型膠原mRNA的表達(dá)水平的測(cè)定,來(lái)進(jìn)一步探討骨關(guān)節(jié)炎的病因,以便尋求更好的臨床治療方法。方法:12份骨關(guān)節(jié)炎軟骨標(biāo)本取白骨關(guān)節(jié)炎患者行全膝或全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)后,其中原發(fā)性骨關(guān)節(jié)炎軟骨標(biāo)本5份,繼發(fā)性骨關(guān)節(jié)炎軟骨標(biāo)本7份;9份正常軟骨標(biāo)本取自股骨頸骨折患者行全髖置換術(shù)后,作為對(duì)照組。取等量軟骨組織,充分剪碎,置于
3、0.2%Ⅱ型膠原酶溶液中,37。恒溫?fù)u床中消化6小時(shí),收集軟骨細(xì)胞,抽提軟骨細(xì)胞總RNA,采用逆轉(zhuǎn)錄/聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)得到試驗(yàn)組和對(duì)照組軟骨細(xì)胞II型膠原mRNA和內(nèi)參照β-actin的擴(kuò)增產(chǎn)物,進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,將各目的條帶的灰度值與內(nèi)參照B-actin條帶值相比,得到各指標(biāo)比值。數(shù)據(jù)用SPSSl2.O統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。結(jié)果:II型膠原mRNA在試驗(yàn)組(骨關(guān)節(jié)炎)軟骨細(xì)胞中的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(正常軟骨),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)存在顯著性差
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