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文檔簡介
1、目的:探討中醫(yī)學對“骨痹”發(fā)病機理的認識,揭示驗方“骨痹康”方對IL-1α誘導的人關節(jié)軟骨細胞損傷模型Ⅱ型膠原mRNA表達的調控機制和對軟骨細胞的保護機制;通過隨機對照臨床試驗評價“骨痹康”方治療膝OA的有效性和安全性,為其防治骨關節(jié)炎提供可靠的理論依據(jù)、實驗數(shù)據(jù)和臨床循證證據(jù)。 方法:1理論研究方法:采用文獻學、邏輯推理、比類取象等方法,對OA發(fā)病機理的中醫(yī)學認識進行探討。2 實驗方法:(1)取材手術后人關節(jié)軟骨,培養(yǎng)軟骨細
2、胞;(2)MTT比色法觀察骨痹康對正常和IL-1α誘導的軟骨細胞增殖的影響; (3)RT-PCR法觀察骨痹康對IL-1α誘導的軟骨細胞Ⅱ型膠原mRNA表達的影響;(4)免疫組織化學法觀察骨痹康對IL-1α誘導的軟骨細胞Ⅱ型膠原表達的影響。3 臨床研究方法:采用隨機平行對照的試驗方法,入選病例隨機分為試驗組和對照組。試驗組給予骨痹康水煎劑每日一劑,對照組給予維骨力2粒,每日3次,療程4周。治療前后兩組分別評價其WOMAC指數(shù)、中醫(yī)證候
3、改善情況、關節(jié)壓痛改善情況、關節(jié)腫脹改善情況、關節(jié)活動度的改善情況、起效時間、合用泰諾林的粒數(shù)和時間、不良反應、實驗室安全指標的檢測情況。 結果:1 理論研究結果:根據(jù)導師張前德教授的學術思想,骨關節(jié)炎根本病機為“腎虛絡痹”即肝腎虧虛、痰瘀阻絡,病變部位在關節(jié)絡脈,不外絡虛、絡實,絡虛是肝腎不足、氣血虧虛、絡脈失養(yǎng);絡實是痰瘀互結、邪滯絡脈。其中絡虛為始動因素,絡脈瘀滯為其病變形成的最終病理基礎。臨床治療骨關節(jié)炎應考慮其臨床癥
4、狀和發(fā)病特點,在辨證的基礎上,注重“補腎通絡”。2 實驗研究結果:(1)成功培養(yǎng)取材于6例患者關節(jié)術后軟骨的軟骨細胞;(2)MTT比色法觀察骨痹康對軟骨細胞增殖的影響,結果顯示:骨痹康0.0750mg/mL、0.3750mg/mL、0.7500mg/mL三個濃度均可顯著促進正常和IL-1α誘導的軟骨細胞的增殖,療效呈劑量依賴性;(3)RT—PcR結果:所有標本的mRNA擴增產物中都能看到預期長度的Ⅱ型膠原特異性條帶,IL-1α誘導的軟骨
5、細胞較正常軟骨細胞Ⅱ型膠原mRNA表達減弱;骨痹康0.7500mg/mL藥物濃度可顯著上調IL-1α誘導的軟骨細胞Ⅱ型膠原mRNA表達;(4)免疫組織化學結果顯示:各組標本均可見Ⅱ型膠原表達,表達部位為胞漿,可見棕黃色顆粒。IL-1α誘導的軟骨細胞較正常軟骨細胞Ⅱ型膠原表達減弱;中藥骨痹康0.3750mg/mL和0.7500mg/mL藥物濃度均可促使IL-1α誘導的軟骨細胞Ⅱ型膠原表達增強。3 臨床研究結果:總體療效評價試驗組總有效率9
6、3.33%,優(yōu)于對照組70%;試驗組和對照組治療后WOMAC總指數(shù)以及疼痛、功能均較治療前明顯下降,有顯著差異(P<0.05~0.01),僵硬無顯著性變化;治療后兩組WOMAC總指數(shù)和功能對比,無顯著性差異(P>0.05),兩藥在改蓋WOMAC總指數(shù)和功能方面效果相當:試驗組和對照組疼痛改善情況比較,對照組的效果更好,有顯著差異(P<0.05);骨痹康方治療后能明顯降低疼痛指數(shù),改善關節(jié)壓痛、腫脹和腰膝酸軟,效果較維骨力為好;骨痹康起效
7、較維骨力快;與對照組比較,試驗組合用泰諾林的人數(shù)和總量均較少;兩組均未發(fā)現(xiàn)嚴重的不良反應。 結論:骨痹康方對正常的和IL-1α誘導的軟骨細胞損傷模型有良好的促進增殖的作用,且成劑量依賴性;在轉錄水平有效阻止了IL-1為首的細胞因子對軟骨的損傷效應,具有促進軟骨細胞合成代謝的某種/某些有效成分,在轉錄和翻譯水平促進軟骨細胞的正常合成代謝,維持軟骨細胞正常Ⅱ型膠原表型的表達,對軟骨具有保護作用;能改善膝骨關節(jié)炎患者的臨床癥狀和體征,安全,
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